淋菌株の宿主応答における株間の多様性の検討

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K11061
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 志牟田 健 国立感染症研究所, 細菌第一部, 主任研究官 (40370960)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 性感染症 / 淋菌感染症

研究実績の概要

宿主細胞に対する淋菌株間の反応性の違いについて比較検討するために、培養細胞 (HeLa細胞)を用いた淋菌の細胞接着性について検討を行った。現在の流行株を遺伝学的に分類するために系統解析を行った。系統解析は、前年度までに2015年度分離株 (n=205)のゲノムシークエンスデータ (illumina MiSeqシステム)を得て、Multilocus sequence typing (MLST)法により行った。その結果、MLST1901、MLST7363、MLST7819、MLST7359、MLST1579の合計5系統が代表的な系統を示すことを明らかにした。MLST7359系統に属する株の多くは、治療薬剤に対して感受性を示した。これら5系統に属する菌株による培養細胞を用いた感染実験 (MOI=10、90min)において、培養細胞に接着した菌数をカウントした。培養細胞に対する細胞接着性については、淋菌株間に差異が見られた。しかし、この差異は系統に依存した結果とはならなかった。次に、宿主細胞の炎症反応に影響を与えるLOS (lipooligosaccharide)の発現パターンについてこれらMLST1901、MLST7363、MLST7819、MLST7359、MLST1579の合計5系統の株について調べた。LOSの抽出はホットフェノール水抽出法にて行った。SDS-PAGEによる展開後、銀染色を行った。その結果、淋菌株間においてその発現パターンに若干の差異が見られたが、系統に依存した差異は認められなかった。

研究成果

• [雑誌論文] A Loop-Mediated Isothermal Amplification Assay Targeting Neisseria gonorrhoeae penA-60.001 (2019)
  • 著者名/発表者名: Shimuta K, Nakayama SI, Takahashi H, Ohnishi M
  • 雑誌名: Antimicrob Agents Chemother. 巻: 64(1) ページ: pii: e01663-19
  • DOI: 10.1128/AAC.01663-19
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clonal expansion and spread of the ceftriaxone-resistant Neisseria gonorrhoeae strain FC428, identified in Japan in 2015, and closely related isolates (2019)
  • 著者名/発表者名: Lee K, Nakayama SI, Osawa K, Yoshida H, Arakawa S, Furubayashi KI, Kameoka H, Shimuta K, Kawahata T, Unemo M, Ohnishi M
  • 雑誌名: J Antimicrob Chemother 巻: 74(7) ページ: 1812-19
  • DOI: 10.1093/jac/dkz129
  • 査読あり
• [学会発表] SNPタイピングによるセフトリアキソン耐性淋菌株の保持するpenA 遺伝子のLAMP法による検出 (2020)
  • 著者名/発表者名: 志牟田 健
  • 学会等名: 第12回LAMP研究会
• [学会発表] 2018年にわが国で分離された淋菌の薬剤感受性報告 (2019)
  • 著者名/発表者名: 安田満、志牟田健、中山周一、小林寅喆、大澤佳代、陣内理生、三宅啓文、浜砂良一、荒川創一、大西真
  • 学会等名: 日本性感染症学会 第32回学術大会
• [学会発表] 淋菌pneA 60.001遺伝子のLAMP法による検出 (2019)
  • 著者名/発表者名: 志牟田 健、中山周一、高橋英之、大 西 真
  • 学会等名: 日本性感染症学会 第32回学術大会