子宮体癌の微小環境を増悪させるマイクロRNA-EZH2フィードバックループの解明

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K11123
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 金野 陽輔 北海道大学, 医学研究院, 助教 (10572703)
• 研究分担者: 董 培新 北海道大学, 医学研究院, 助教 (50602504) ; 櫻木 範明 北海道大学, 医学研究院, 名誉教授 (70153963) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 子宮体癌

研究実績の概要

まず、Western blot法によりEZH2遺伝子のノックアウトとlet-7bの過剰発現によるIL-6/8の発現低下を確認した。IL-6/8の添加による体癌細胞悪性形質の増強を確認した。そしてIL-6/8を標的とするmiRNA群をin silico法で予測し、EZH2により発現抑制されるmiRNA候補と照合することで、EZH2によるlet-7bなど複数のmiRNA発現の抑制が、IL-6/8産生量の増加を導いたことを明らかにした。更にEZH2特異的阻害剤GSK343の処理で、EZH2の不活性化を誘導すると、Twist、Snail、p-STAT3、NF-κB及びβ-cateninの蛋白質発現及びIL-6/8の産生量の低下を認めた。また、STAT3阻害剤BP-1-102、NF-κB阻害剤BAY11-708、Wnt/β-catenin経路抑制剤ICG-00Iの投与により、EZH2は下流に位置するSTAT3経路、NF-κB経路及びWnt/β-catenin経路の活発化を介して、体癌細胞におけるIL-6/8の異常産生また体癌細胞悪性形質の増強を促進することを明らかにした。体癌細胞を使用した解析では、EZH2は癌遺伝子MMSETの発現を上昇させることで、IL-6/8の発現を増加することも解明した。EZH2特異的抑制剤GSK343の添加により、体癌、子宮頸癌及び卵巣癌細胞の増殖能と浸潤能は、濃度依存性に抑制されたことも明らかになった。また、GSK343と5-AZAの組み合わせによる相乗的な癌抑制効果を認めた。両者の併用で相乗的な抗腫瘍効果を発揮することで、新たな婦人科癌治療法として十分に期待できると考えられる。以上の研究によって、EZH2と癌抑制miRNA群が相互に負のフィードバックループを形成して、EZH2の発現亢進及びlet-7bなどのmiRNAの発現低下を招き、下流にあるTwist、Snail、STAT3経路、NF-κB経路及びWnt/β-catenin経路の活発化を介して、IL-6/8過剰産生及び体癌の悪性化を導くという重要な成果が得られている。本研究により得られた知見は、今後体癌の根絶を目指す基層研究の発展及び新しい治療法の開発に大きく貢献していると考えられる。

研究成果

• [国際共同研究] University of Tennessee(米国)
  • 国名: 米国
  • 外国機関名: University of Tennessee
• [国際共同研究] Sun Yat-sen University(中国)
  • 国名: 中国
  • 外国機関名: Sun Yat-sen University
• [雑誌論文] B7H3 As a Promoter of Metastasis and Promising Therapeutic Target (2018)
  • 著者名/発表者名: Dong Peixin、Xiong Ying、Yue Junming、Hanley Sharon J. B.、Watari Hidemichi
  • 雑誌名: Frontiers in Oncology 巻: 8 ページ: 264～268
  • DOI: 10.3389/fonc.2018.00264
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Tumor-Intrinsic PD-L1 Signaling in Cancer Initiation, Development and Treatment: Beyond Immune Evasion (2018)
  • 著者名/発表者名: Dong Peixin、Xiong Ying、Yue Junming、Hanley Sharon J. B.、Watari Hidemichi
  • 雑誌名: Frontiers in Oncology 巻: 8 ページ: 386～396
  • DOI: 10.3389/fonc.2018.00386
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Long Non-coding RNA NEAT1: A Novel Target for Diagnosis and Therapy in Human Tumors (2018)
  • 著者名/発表者名: Dong Peixin、Xiong Ying、Yue Junming、Hanley Sharon J. B.、Kobayashi Noriko、Todo Yukiharu、Watari Hidemichi
  • 雑誌名: Frontiers in Genetics 巻: 9 ページ: 471～451
  • DOI: 10.3389/fgene.2018.00471
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Lentiviral vector mediated-ASAP1 expression promotes epithelial to mesenchymal transition in ovarian cancer cells (2018)
  • 著者名/発表者名: Zhang Tao、Zhao Guannan、Yang Chuanhe、Dong Peixin、Watari Hidemichi、Zeng Lin、Pfeffer Lawrence、Yue Junming
  • 雑誌名: Oncology Letters 巻: 15 ページ: 4432～4438
  • DOI: 10.3892/ol.2018.7834
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Comparison of human papillomavirus genotyping and cytology triage, COMPACT Study: Design, methods and baseline results in 14 642 women (2018)
  • 著者名/発表者名: Aoyama-Kikawa Satomi、Fujita Hiromasa、Hanley Sharon J.B.、Kasamo Mitsunori、Kikuchi Kokichi、Torigoe Toshihiko、Matsuno Yoshihiro、Tamakoshi Akiko、Sasaki Takayuki、Matsuura Motoki、Kato Yasuhito、Dong Peixin、Watari Hidemichi、Saito Tsuyoshi、Sengoku Kazuo、Sakuragi Noriaki
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 109 ページ: 2003～2012
  • DOI: 10.1111/cas.13608
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] miR-34a, miR-424 and miR-513 inhibit MMSET expression to repress endometrial cancer cell invasion and sphere formation (2018)
  • 著者名/発表者名: Dong Peixin、Xiong Ying、Yue Junming、Hanley Sharon J.B.、Watari Hidemichi
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 9 ページ: 23253～23263
  • DOI: 10.18632/oncotarget.25298
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Control of PD-L1 expression by miR-140/142/340/383 and oncogenic activation of the OCT4?miR-18a pathway in cervical cancer (2018)
  • 著者名/発表者名: Dong Peixin、Xiong Ying、Yu Jiehai、Chen Lin、Tao Tang、Yi Song、Hanley Sharon J. B.、Yue Junming、Watari Hidemichi、Sakuragi Noriaki
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 37 ページ: 5257～5268
  • DOI: 10.1038/s41388-018-0347-4
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] miR-203 inhibits ovarian tumor metastasis by targeting BIRC5 and attenuating the TGFβ pathway (2018)
  • 著者名/発表者名: Wang Baojin、Li Xia、Zhao Guannan、Yan Huan、Dong Peixin、Watari Hidemichi、Sims Michelle、Li Wei、Pfeffer Lawrence M、Guo Yuqi、Yue Junming
  • 雑誌名: Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 巻: 37 ページ: 235～240
  • DOI: 10.1186/s13046-018-0906-0
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Knockout of MTF1 Inhibits the Epithelial to Mesenchymal Transition in Ovarian Cancer Cells (2018)
  • 著者名/発表者名: Ji Liang、Zhao Guannan、Zhang Peng、Huo Wenying、Dong Peixin、Watari Hidemichi、Jia Limin、Pfeffer Lawrence M、Yue Junming、Zheng Jinhua
  • 雑誌名: Journal of Cancer 巻: 9 ページ: 4578～4585
  • DOI: 10.7150/jca.28040
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] 高悪性度体がんのジェネティック・エピジェネティック研究 (2018)
  • 著者名/発表者名: 董 培新
  • 学会等名: 「総合女性医療システム学分野」記念シンポジウム, 京王プラザホテル札幌(北海道札幌市)
• [学会発表] 高悪性度子宮体癌細胞に対するEZH2特異的阻害剤の抗腫瘍効果とその分子機構 (2018)
  • 著者名/発表者名: 董 培新
  • 学会等名: 第27回日本癌病態治療研究会, ホテルポートプラザ千葉(千葉県千葉市
• [学会発表] Musashi-2, a novel oncoprotein promoting cervical cancer cell growth and invasion, is negatively regulated by p53-induced (2018)
  • 著者名/発表者名: Dong Peixin
  • 学会等名: IGCS 2018, Kyoto (Japan)
  • 国際学会
• [学会発表] Evaluation of partial genotyping with HPV 16/18 for triage of HPV positive cytology negative Japanese women: Baseline results of the COMPACT study (2018)
  • 著者名/発表者名: Aoyama-Kikawa S, Fujita H, Hanley SJB, Kasamo M, Kikuchi K, Torigoe T, Matsuno Y, Tamakoshi A, Sasaki T, Matsuura M, Kato Y,Dong P, Watari H, Saito T, Sengoku K, Sakuragi N
  • 学会等名: The 32nd International Papillomavirus Conference, Sydney (Australia)
  • 国際学会
• [学会発表] Comparison of HPV genotyping and cytology triage, COMPACT-Study: Design, methods and baseline results in 14,642 women (2018)
  • 著者名/発表者名: 3.Aoyama-Kikawa S, Fujita H, Hanley SJB, Kasamo M, Kikuchi K, Torigoe T, Matsuno Y, Tamakoshi A, Sasaki T, Matsuura M, Kato Y, Dong P, Watari H, Saito T, Sengoku K, Sakuragi N
  • 学会等名: The 32nd International Papillomavirus Conference, Sydney (Australia)
  • 国際学会
• [学会発表] miR-137 and miR-34a directly target snail and inhibit EMT, invasion and sphere-forming ability of ovarian cancer cells (2018)
  • 著者名/発表者名: Dong Peixin
  • 学会等名: The 12th World Congress of Regenerative Medicine & Stem Cell-2018, Xian (China)
  • 国際学会 / 招待講演
• [備考] https://www.hokudai.ac.jp/