| 研究課題/領域番号 |
16K11164
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| 研究機関 | 大阪医科大学 |
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研究代表者 |
林 正美 大阪医科大学, 医学部, 講師 (00551748)
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| 研究分担者 |
大道 正英 大阪医科大学, 医学部, 教授 (10283764)
田中 良道 大阪医科大学, 医学部, 講師 (10625502)
田辺 晃子 大阪医科大学, 医学部, 非常勤講師 (70454543)
佐々木 浩 大阪医科大学, 医学部, 助教 (80432491)
寺井 義人 大阪医科大学, 医学部, 准教授 (90278531)
藤原 聡枝 大阪医科大学, 医学部, 講師 (90707960)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | マイクロRNA / 子宮頚癌 / エクソソーム |
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| 研究実績の概要 |
マイクロRNA(miRNAs)は標的遺伝子の発現を抑制する。我々はmiR-22に着目し、種々の検討を行った。miR-22を子宮頸癌株に遺伝子導入すると細胞増殖が抑制された。また、miR-22を子宮頚癌細胞株へ遺伝子導入すると、テロメラーゼ逆転写酵素(TERT)の遺伝子発現が抑制された。子宮頸癌ではテロメアーゼ活性が低下すると放射線感受性が改善するという報告がある。そのため、miR-22によるTERT遺伝子の発現抑制は、放射線感受性を増強させるのではないかと考え、子宮頸癌細胞株にmiR-22を遺伝子導入し放射線感受性を検証したところ、miR-22を子宮頸癌細胞株に遺伝子導入すると放射線感受性が高まった。
エクソソームは、細胞から分泌されるナノサイズの細胞外顆粒で、脂質二重膜構造に、シグナル伝達物質、mRNAやmiRNAなどの遺伝子発現調節因子を内包し、血清、唾液、尿、母乳などの体液に分泌される。
今回、子宮頸癌細胞へmiR-22を輸送するため、miR-22を高濃度に内包したエクソソームを作成し、子宮頸癌治療における新たなドラッグデリバリーシステムへの応用を目的に研究を行った。
HEK293細胞に、miR-22をLipofectamineにより遺伝子導入した。次いで、そのHEK293細胞が分泌するエクソソームを回収することにより、miR-22を高濃度に内包したエクソソームを抽出した。そのエクソソームを子宮頸癌細胞株に投与し、放射線治療への効果をClonogenic assayで評価した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
計画していたin vitroの実験を遂行することができている。
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| 今後の研究の推進方策 |
回収したエクソソーム粒子のさらなる解析として、ナノ粒子解析システム装置および電子顕微鏡を用いた観察を行う予定である。
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