| 研究課題/領域番号 |
16K11180
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
喜多 知子 (嶋知子) 京都大学, 医学研究科, 特定助教 (20362519)
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| 研究分担者 |
中川 隆之 京都大学, 医学研究科, 講師 (50335270)
山田 勇磨 北海道大学, 薬学研究院, 准教授 (60451431)
山口 太郎 摂南大学, 薬学部, 助教 (30710701)
北尻 真一郎 京都大学, 医学研究科, 特定研究員 (00532970)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | 内耳 / ドラッグデリバリー / ナノキャリア |
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| 研究実績の概要 |
本研究は、耳科学と薬剤学との融合研究であり、効率的な内耳送達を達成するための新知見を創出することを目的とする。今年度は以下の項目につき検討を進めた。
・ラセン靭帯の血管内皮細胞のキャラクタリゼーションおよび初代培養株の確立：既報（Nengら）を参考に、まずyoung adultマウスの内耳蝸牛を摘出し、部位別（血管条・ラセン靭帯・コルチ器とラセン神経）に分けて、酵素処理（TrypLE）による細胞単離の後、異なる培養液（Pericyte用・Epithelial cell用）にて２段階の培養を行った。その結果、Epithelial cell用では形状の異なる複数種の細胞が、その後のPericyte用で数日培養により線維芽細胞様の形態の細胞のみになった。これらの細胞は、Nestin陽性、CD34陽性、CD31陰性であり、Nengらの血管条での報告と同一のキャラクターを示した。この細胞はF4/80陰性でdesmin陽性でもあったことから、pericyte前駆細胞の可能性が高いと考えられた。
・In vivo動物実験：モルモット内耳へのゲル留置および内耳リンパ液採取法について、実験手技の確認を行った。正円窓付近に留置できるゲル容量から、最大で10 uLの薬液を浸漬したゲルを留置することが可能であった。また内耳リンパ液の採取は、陰圧にすると脳せき髄液が混入するため、１蝸牛あたり2 uLが限界であった。一方、脳せき髄液混入も含めた内耳リンパ液採取の場合、１蝸牛あたり10 uL採取可能であった。
・ナノキャリアの細胞以降実験：蛍光ラベルされたナノキャリアをマウス蝸牛器官培養系に添加した結果、複数の細胞への取り込みが確認された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
本年度の研究計画のうち、「初代培養株の樹立」と「マイクロアレイによるキャラクタリゼーション」において若干の遅れがでている。しかしながら、着実に進めており、種々の新知見が得られている。
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| 今後の研究の推進方策 |
現在、国内で唯一の血液脳関門初代培養系を確立・維持されている福岡大学・薬・片岡教授らの教示を受け、加速して検討を進めている。
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