加齢黄斑変性の病態におけるブルッフ膜への加齢性沈着脂質の役割の解明

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 16K11293
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 安川 力 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 准教授 (00324632)
• 研究分担者: 小椋 祐一郎 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (70191963) ; 平野 佳男 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (40405163) ; 堂前 純子 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 准教授 (70227700)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 加齢黄斑変性 / 網膜色素上皮 / ブルッフ膜 / 脂質 / リポフスチン / ノックアウトマウス / 光障害 / 慢性炎症

研究実績の概要

加齢黄斑変性の病態として、出生直後から始まる網膜色素上皮（RPE）内へのリポフスチン蓄積に続く、３０代頃からのRPE下への脂質沈着が重要であると考える。しかし、現在の検査機器で沈着した脂質を示唆する所見についてよくわかっていない。F１０と言うニデック社の共焦点走査型ダイオードレーザー検眼鏡のDR/DLモードで眼底に写る黒い陰影が脂質である可能性に我々は注目し、ボランティアの片眼と加齢黄斑変性および中心性漿液性脈絡網膜症の僚眼に対して、この機器を用いて撮像した。また、被験者の年齢、喫煙歴、高血圧、高脂血症の有無などを聴取した。結果、予想通り、加齢眼であるほど、また、喫煙のsmoking index（本数X年数）が多いほど、黒い陰影を広範囲に認めた。次に、脂質沈着マウスとして、ApoEノックアウトマウスと、ABCA1ノックアウトマウス、ABCA7ノックアウトマウスの８ヶ月以上の月齢のものを加齢マウス、生後２ヶ月以前のものを若年マウスとして、対照としてC57/BL6マウスを用いて、安楽死後、眼球を摘出の上、2.5%グルタルアルデヒド＋2％パラホルムアルデヒド溶液で固定し、凍結切片作製の上、透過型電子顕微鏡で観察のための処理を行い、現在、観察中である。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

実験助手が２８年度に２人交代になり、免疫染色、電子顕微鏡による観察のための切片の作製の段階で滞ったため。
また、ノックアウトマウスを譲渡してもらう予定の研究分担者の堂前純子が異動となり動物の管理者の整備に時間を要した。

今後の研究の推進方策

新しい実験助手はすでに当施設の別の研究グループに所属していた者で、施設には慣れており、実験手法も習得しているので、速やかに免疫組織学的検討を進めることが可能と考えている。
また、当初、２８年度以降に行う予定の脂質沈着マウスへの光線暴露負荷の予備実験と、２９年度以降に行う予定のレーザー誘導脈絡膜新生血管モデルの作製の予備実験も進めており、ノックアウトマウスの整理がつき次第、進めていく予定である。堂前純子は眼科の研究員として、引き続き、研究分担者として研究に参加してもらうこととした。

次年度使用額が生じた理由

物品購入の際、端数が生じたため。

次年度使用額の使用計画

物品費で使用する。

研究成果

• [雑誌論文] A multicenter randomized controlled study of antioxidant supplementation with lutein for chronic central serous chorioretinopathy. (2017)
  • 著者名/発表者名: Shinojima A, Sawa M, Sekiryu T, Oshima Y, Mori R, Hara C, Sugano Y, Kato A, Asato H, Yuzawa M, Gomi F, Ogura Y, Ishibashi T, Nanri T, Yasukawa T.
  • 雑誌名: Ophthalmologica 巻: 237 ページ: 159-166
  • DOI: 10.1159/000455807
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of peripheral fundus autofluorescence in eyes with wet age-related macular degeneration. (2016)
  • 著者名/発表者名: Suetsugu T, Kato A, Yoshida M, Yasukawa T, Nishiwaki A, Hasegawa N, Usui H, Ogura Y.
  • 雑誌名: Clin Ophthalmol 巻: 10 ページ: 2497-2503
  • DOI: 10.2147/OPTH.S120402
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Low-frequency coding variants in CETP and CFB are associated with susceptibility of exudative age-related macular degeneration in the Japanese population. (2016)
  • 著者名/発表者名: Momozawa Y, Akiyama M, Kamatani Y, Arakawa S, Yasuda M, Yoshida S, Oshima Y, Mori R, Tanaka K, Mori K, Inoue S, Terasaki H, Yasuma T, Honda S, Miki A, Inoue M, Fujisawa K, Takahashi K, Yasukawa T, Yanagi Y, Kadonosono K, Sonoda K, Ishibashi T, Takahashi A, Kudo M.
  • 雑誌名: Hum Mol Genet 巻: 25 ページ: 5027-5034
  • DOI: 10.1093/hmg/ddw335
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tissue plasminogen activator as an anti-angiogenic agent in experimental laser-induced choroidal neovascularization in mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ozone D, Mizutani T, Nozaki M, Ohbayashi M, Hasegawa N, Kato A, Yasukawa T, Ogura Y.
  • 雑誌名: Invest Ophthalmic Vis Sci 巻: 57 ページ: 5348-5354
  • DOI: 10.1167/iovs.16-19617
  • 査読あり
• [雑誌論文] Investigation of the etiology of central serous chorioretinopathy using en face OCT and indocyanine green angiography. (2016)
  • 著者名/発表者名: Shinojima A, Fujita K, Mori R, Kawamura A, Yuzawa M, Yasukawa T.
  • 雑誌名: Ophthalmologic 巻: 236 ページ: 100-107
  • DOI: 10.1159/000448342
  • 査読あり
• [雑誌論文] Densitometry of choroidal vessels in eyes with and without central serous chorioretinopathy by wide-field indocyanine green angiography. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hirahara S, Yasukawa T, Kominami A, Nozaki M, Ogura Y.
  • 雑誌名: Am J Ophtahlmol 巻: 166 ページ: 103-111
  • DOI: 10.1016/j.ajo.2016.03.040
  • 査読あり
• [雑誌論文] Malondialdehyde induces autophagy dysfunction and VEGF secretion in the retinal pigment epithelium in age-related macular degeneration. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ye F, Kaneko H, Hayashi Y, Takayama K, Hwang SJ, Nishizawa Y, Kimoto R, Nagasaka Y, Tsunekawa T, Matsuura M, Yasukawa T, Kondo T, Terasaki H.
  • 雑誌名: Free Rad Biol Med. 巻: 64 ページ: 121-134
  • DOI: 10.1016/j.freeradbiomed.2016.02.027
  • 査読あり
• [雑誌論文] Combination therapy with intravitreal tissue plasminogen activator and ranibizumab for subfoveal type 2 choroidal neovascularization. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kachi I, Yasukawa T, Kato A, Takase N, Morita H, Kubota A, Hirano Y, Uemura A, Ogura Y.
  • 雑誌名: Jpn J Ophthalmol. 巻: 60 ページ: 179-186
  • DOI: 10.1007/s10384-016-0434-4
  • 査読あり
• [学会発表] Combination therapy of intravitreal tissue plasminogen activator and ranibizumab for type 2 choroidal neovascularization: a pilot study. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yasukawa T, Ogura Y.
  • 学会等名: 30th meeting of the Club Jules Gonin
  • 発表場所: Bordeaux (France)
  • 年月日: 2016-07-06 – 2016-07-09
  • 国際学会
• [学会発表] Visual outcomes of polypoidal choroidal vasculopathy with or without prompt treatment. (2016)
  • 著者名/発表者名: Masko S, Yasukawa T, Hirahara S, Fujino S, Kato A, Nishiwaki A, Yoshida M, Ogura Y.
  • 学会等名: ARVO
  • 発表場所: Seattle, WA (USA)
  • 年月日: 2016-05-01 – 2016-05-05
  • 国際学会