研究課題/領域番号 |
16K11328
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研究機関 | 岩手医科大学 |
研究代表者 |
橋爪 公平 岩手医科大学, 医学部, 講師 (50407095)
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研究分担者 |
黒坂 大次郎 岩手医科大学, 医学部, 教授 (20215099)
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研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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キーワード | 白内障 / 加齢性眼疾患 / 酸化ストレス / 抗酸化 / ステロイド |
研究実績の概要 |
ステロイド誘発鶏胚白内障モデルは、15日齢の鶏受精卵にステロイド(ヒドロコルチゾン)を投与すると、48時間以内に約90%以上の水晶体において核質部が白濁するモデルである。この混濁は肝臓で生じる酸化ストレス(過酸化脂質)によって生じ、よって抗酸化作用を持つ薬剤のスクリーニングに有用なモデルであるとともに、その作成や薬剤投与が簡便であるため、優れた動物実験モデルと言える。具体的には放卵後の受精卵を37℃で孵置し、15日齢で受精鶏卵気室部にヒドロコルチゾン0.50 nmol/eggを投与する。薬剤の投与は、半減期が短いものでは 、ヒドロコルチゾン投与後3回(3時間後、10時間後、20時間後行い、半減期の長いものでは、ヒドロコルチゾン投与後1回(3時間後)投与 する。水溶性の薬剤は生理食塩水に溶解し、脂溶性のものはDMSOに溶解して投与する。ヒドロコルチゾン投与後48時間後に解剖を行う。鶏胚を摘出し、角膜輪部に切開を加え水晶体を摘出し、摘出水晶体の混濁の程 度を1~5にスコア化し評価する。また摘出水晶体のチオール活性を測定することによって、水晶体中の還元型グルタチオン量を求める 。 平成29年度はいくつかの抗酸化物質を用いて、緑茶に豊富に含まれる緑茶ポリフェノールが濃度に依存してステロイド誘発鶏胚白内障モデルで白内障を抑制することを明らかにした。柿の葉の成分であるタンニンとウコンの成分であるクルクミンは白内障を抑制したが、抑制しうる濃度では、鶏胚の生存率が低かった。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
孵卵器の調子が悪く、実験が思うように出来ない時期があった。 新たな孵卵器の購入に関して、価格面で折り合わなかった。このため研究はやや遅れており、早期の解決が必要である。
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今後の研究の推進方策 |
平成30年度はラットのストレプトゾトシン糖白内障モデル、マウスの紫外線誘発白内障モデルを用いて、よりヒトに近い モデルで白内障を抑制できるか検証し、水晶体タンパクの解析を行い、白内障の病態そのものを明らかにする。
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次年度使用額が生じた理由 |
新たな孵卵器の購入を希望したが、価格面で折り合わなく、平成29年度の購入を断念したため。
平成30年度は、別機種の孵卵器の購入し、研究を進めていく予定である。
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