| 研究課題/領域番号 |
16K11685
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
水田 邦子 広島大学, 医歯薬保健学研究院(歯), 助教 (40432679)
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| 研究分担者 |
飛梅 圭 広島大学, 医歯薬保健学研究院(歯), 准教授 (40350037)
久保薗 和美 広島大学, 病院(歯), 歯科診療医 (80750132)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | TMEM16E / ノックアウトマウス / 筋ジストロフィー / GDD |
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| 研究実績の概要 |
顎骨骨幹異形成症（GDD）は顎骨と四肢長管骨の病変を特徴とする常染色体優性遺伝の骨系統疾患である。その疾患責任遺伝子として同定されたTMEM16E遺伝子は、さらに、常染色体劣性遺伝する筋ジストロフィーの原因遺伝子であることが見出された。
TMEM16E遺伝子産物の生化学的機能やその変異により引き起こされる病態の発症メカニズムは、未だ明らかにされていない。本研究は、TMEM16E遺伝子の機能および生理的役割を解明することを目的とし、TMEM16Eノックアウトマウスおよびノックインマウスを作製し、疾患モデルの確立に努めてきた。
これまでの研究成果から、TMEM16Eに機能獲得型変異がおこると蛋白の安定性獲得による生理機能発揮がGDDを発症させ、機能喪失型変異により筋疾患が発症することが予想される。TMEM16Eの活性制御が骨・筋肉の分化および代謝に重要な機能を果たしていることは明らかで、TMEM16Eの組織特異的な蛋白安定化機構、およびオルガネラ膜局在機構は、これら遺伝性疾患の発症機構に直接的に結びつくものと考えられる。
本年度の研究計画では、TMEM16Eを特異的に認識するモノクローナル抗体を作製し、その特異性についての評価するための解析を進めている。
また、TMEM16Eノックアウトマウスおよびノックインマウスの繁殖・系統維持および表現型解析を行い、疾患モデルマウスとして病態の発生機序について詳細な検討を行っている。なかでも、TMEM16Eノックインマウスは臓器特異的な異常所見を示唆したため詳細な解析を進行している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
これまでに作製したTMEM16Eノックアウトマウスおよび顎骨骨幹異形成症罹患者のIMEM16E遺伝子でみられるアミノ酸変異を再現したノックインマウス(顎骨骨幹異形成症モデルマウス)の繁殖・系統維持と表現型解析を行ってきた。しかしながら、TMEM16Eの内在性タンパクの顕著な不安定性とTMEM16Eを特異的・高感度に認識する抗体がないことから研究の進行に遅れをとっている。
また、他研究機関が相次いで本遺伝子ノックアウトマウスの表現型解析の結果を学術誌で報告しており、われわれは他グループより遅れをとっている。
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| 今後の研究の推進方策 |
引き続き、動物モデル（ノックアウトマウスおよびノックインマウス）の繁殖・系統維持と解析を行う。
また、新規に作成した抗体の特異性の評価を検証するとともに、疾患発症の分子機構についてin vitroの系においても生化学的な解析を進めていく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
マウスの繁殖・系統維持に時間を要したことから、予定していた表現型解析が滞り、若干の次年度使用額が生じた
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| 次年度使用額の使用計画 |
次年度使用額は疾患モデルマウスの確立のため、ノックアウトおよびノックインマウスの繁殖・系統維持・解析に使用する。
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