| 研究課題/領域番号 |
16K11688
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| 研究機関 | 高知大学 |
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研究代表者 |
仙頭 慎哉 高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 助教 (30635264)
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| 研究分担者 |
山本 哲也 高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 教授 (00200824)
笹部 衣里 高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 講師 (40363288)
北村 直也 高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 講師 (70351921)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | エクソソーム / EGFR / マクロピノサイトーシス |
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| 研究実績の概要 |
【目的】我々はこれまでに口腔扁平上皮癌において、癌細胞が分泌するエクソソームは、癌細胞自身に取り込まれ、浸潤や転移を促進することを明らかにしてきたが、エクソソームの分泌および細胞内への取り込み機構は十分に解明されていない。本研究では、口腔扁平上皮癌の発育・進展を促進する上皮成長因子受容体（EGFR）に着目し、口腔扁平上皮癌細胞におけるエクソソームの分泌および取り込みにおける関与を検討した。
【方法】OSC4にEGFR-siRNAを導入し、内在性EGFRの発現をノックダウンさせた細胞を用いるとともに、rhEGF、EGFR分子標的治療薬であるエルロチニブ、セツキシマブでOSC4細胞を処理し、培養上清よりエクソソームを分離した。分泌への影響はエクソソームのCD9の発現についてWestern blottingにて比較検討を行い、取り込みへの影響はPKH26で各エクソソームを標識した後、培養液に添加し、共焦点顕微鏡およびフローサイトメトリー法にて評価した。
【結果】EGFRノックダウン細胞ではエクソソームの分泌量および取り込み量は共に減少した。一方、rhEGF刺激によりエクソソームの分泌量、取り込み量は増加し、エルロチニブ、セツキシマブ処理により減少した。また、その効果はセツキシマブよりもエルロチニブ処理でより顕著に認められた。
【考察】以上より、OSC細胞においてEGFRシグナルはエクソソームの分泌と取り込みの両者を促進し、癌の発育・進展を正に制御している可能性が示唆された。
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