| 研究課題/領域番号 |
16K11724
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| 研究機関 | 愛媛大学 |
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研究代表者 |
日野 聡史 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (90359927)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | 口腔癌 / 転移 / アポトーシス |
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| 研究実績の概要 |
これまでの研究結果から、本研究では口腔癌細胞のアポトーシス/アノイキス抵抗性に関わるKey moleculeとして、SrcとA20に着目することになった。本年度はまず、Srcの量的、質的（活性化状態）変化とTNF-related apoptosis inducing ligand (TRAIL)の感受性との関係を詳細に検討した。
SAS（親株）、SAS-T5（高転移株）、SAS-L1（高転移株）細胞におけるSrcの発現をウェスタンブロッティングにて検討した。3種の細胞間でSrcタンパクの発現量自体には明らかな差を認めなかったが、活性型Srcを意味するリン酸化されたp-Src(Tyr 416)の発現はSAS-T5、SAS-L1細胞において亢進していた。一方で、抑制型Srcを意味するp-Src(Tyr 527)の発現は3種の細胞間で有意な差を認めなかった。つまり、Src キナーゼの活性上昇と口腔扁平上皮癌の転移能との関連が示唆された。そこで、Srcキナーゼの選択的阻害剤であるPP2を使用して、Srcの活性化を抑制した際の影響を検索した。PP2処理によって、3種の細胞すべてにおいて経時的、かつ濃度依存的に細胞増殖が有意に抑制された。特に、活性型Srcの発現亢進を認めているSAS-T5、SAS-L1細胞においてその効果が顕著であった。次に、合成siRNAを用いてSrcの発現を特異的にノックダウンした際の影響について検討した。設定した3種のsiRNAはいずれも、Srcの発現を抑制した。SAS、SAS-L1 細胞において、Srcの発現抑制による細胞増殖抑制効果が認められ、その効果はSAS-L1細胞においてより強く認められた。さらに、Srcの発現抑制下でのTRAILの効果を検討したところ、SAS-L1 細胞においてTRAILによる細胞死誘導が認められた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
本研究の遂行に際して、当初予定のeffortが割けなかったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
当初の研究計画通り、Srcの活性化を抑制することが知られているPP2Aと、その阻害因子CIAP2の発現解析を行う。また、A20の発現抑制がTRAIL抵抗性の解除におよぼす影響について検討を加える。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究の遂行が当初案よりやや遅れており、これに要するとして計上した金額が未使用となっているため。また、研究成果の発表を計画していた学会に参加できなかったために、旅費も未使用になっている。
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| 次年度使用額の使用計画 |
当初の計画通りに研究を進める。また、学会への参加も検討する。
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