• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2018 年度 実績報告書

口腔癌における循環癌細胞の分離による個別化治療法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 16K11728
研究機関鹿児島大学

研究代表者

山下 麻由美  鹿児島大学, 医歯学域歯学系, 助教 (80325802)

研究分担者 杉浦 剛  鹿児島大学, 医歯学域歯学系, 教授 (40322292)
高田 耕児  富山県産業技術研究開発センター, その他部局等, 主任研究員 (40530621)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
キーワード循環癌細胞 / 口腔癌 / 個別化治療
研究実績の概要

個別化医療は近年の癌治療における緊急の課題である。また、口腔癌を含む固形癌では、リンパ節転移や遠隔転移が予後を左右する重要な因子である。原発巣の細胞が血管に侵入した結果のCTCは転移のもととされる。従って、血液サンプルからのCTC回収は癌の診断のみでなく、個別化医療を目的としたCTCの遺伝子の特徴の解析にも重要である。我々は、血液サンプルからのCTCの新しい回収法を確立した。
GFP導入ヒト腺様のう胞癌細胞由来であるACCS―MGFP株を用いた。使用したCTC回収装置は従来の様に抗体を使用することなく、細胞のサイズにより分離するため細胞へのダメージが少なく、簡便で安価であるマイクロ流体チップ(SSチップ)を使用した。
まずは健康なヒトの血液1.5mlに1.5×104のACC―M GFP細胞を混合しバッファーとともにSSチップに還流させ、回収した液体を蛍光顕微鏡を使用し観察し緑色に発色した細胞をカウントし回収率を確認した。
次に、8週齢マウスに局麻下に200μlのACC―M GFP細胞が混入した溶液をマウスの腹腔内または尾静脈より注入し腹腔内注射群は24時間または48時間後、尾静脈群は30分後に屠殺し、心臓から血液を採取した。採取した血液は希釈後にSSチップに還流させ、回収溶液を蛍光顕微鏡下に観察し、細胞数をカウントした。
回収した溶液には多くの細胞が含まれ回収率は95%以上であった。一方マウスの血液からは少量のCTCが回収された。回収した細胞は数日間の生存が確認できたが、培養による成長は観察されなかった。
我々のマイクロ流体チップは、高価な装置は必要なく、細胞に致命的障害を与えず、EMTを引き起こした細胞も回収可能である。血液中の癌細胞は極めて少量であり、高い回収率が重要である。今回使用したチップは、回収率が90%以上であり、CTC研究の上で重要な役割を果たすと思われる。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2019 2018

すべて 学会発表 (3件)

  • [学会発表] マイクロ流体チップによるCTCの検出2019

    • 著者名/発表者名
      松村吉晃、高田耕児、久米健一、別府真広、山下麻由美、中村康大、杉浦剛
    • 学会等名
      第37回口腔腫瘍学会学術大会
  • [学会発表] Detection of CTC using SS-Chip2018

    • 著者名/発表者名
      松村吉晃、高田耕児、久米健一、別府真広、中村康大、杉浦剛
    • 学会等名
      第77回日本癌学会学術総会
  • [学会発表] Detection of CTC using SS-Chip2018

    • 著者名/発表者名
      松村吉晃、高田耕児、久米健一、別府真広、山下麻由美、中村康大、杉浦剛
    • 学会等名
      第63回日本口腔外科学会総会・学術大会

URL: 

公開日: 2019-12-27  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi