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2018 年度 実施状況報告書

骨髄間質細胞由来因子による歯周組織再生療法の開発-Down症歯根膜細胞の解析ー

研究課題

研究課題/領域番号 16K11812
研究機関昭和大学

研究代表者

浅川 剛吉  昭和大学, 歯学部, 助教 (20347884)

研究分担者 吉村 健太郎  昭和大学, 歯学部, 助教 (10585699)
宮本 洋一  昭和大学, 歯学部, 准教授 (20295132)
長谷川 智一  徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 講師 (50274668)
上條 竜太郎  昭和大学, 歯学部, 教授 (70233939)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2020-03-31
キーワード歯根膜 / ダウン症候群 / マイクロアレイ解析 / DSCR1 / 発現ベクター
研究実績の概要

ダウン症候群は21 番染色体にある様々な遺伝子の発現調節異常によりダウン症候群の特徴をきたしていると考えられている。われわれは、ダウン症候群永久歯から歯根膜由来細胞を分離培養し、健常者永久歯歯根膜由来細胞と比較解析を行った。
【方法】矯正歯科治療のために抜去した健常者歯根膜細胞(PDL) ,Down 症候群歯根膜細胞 (PDLDS)を無菌的に分離培養した。それぞれから採取した細胞よりRNA を抽出し、Clariom Array(アフィメトリクス社)によるcDNA マイクロアレイ解析を行った。さらに、PDL,PDLDS にSimian virus40 Large T (SV40) およびhuman telomerase reverse transcriptase (hTERT ) の発現ベクターを導入しsingle cell cloning を行い細胞株を作成したTransfection of Periodontal ligament cell1(TAPDL1) と不死化したヘテロな細胞集団Transfection of Periodontal ligament cells derived from human permanent teeth with DownSyndrome(TAPDLDS)を獲得した。(昭和大学歯学部医の倫理委員会承認番号2013-007 号)【結果】cDNA マイクロアレイ解析の結果 PDLDS において、RCAN1, POSTIN の発現の上昇を、OMD,BMP4 の発現の低下を認めた。【考察】21 番染色体上にあるDSCR1 の活性が亢進すると,血管形成に関するカルシニューリンシグナル経路を阻害することで血管新生を抑制する。これらは歯周疾患の治癒過程においても関連があると思われる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

ダウン症候群由来歯根膜細胞へのSimian virus40 Large T (SV40) およびhuman telomerase
reverse transcriptase (hTERT ) の発現ベクターの導入に時間を要した。

今後の研究の推進方策

現在、ダウン症候群由来歯根膜細胞へのSimian virus40 Large T (SV40) およびhuman telomerase reverse transcriptase (hTERT ) の発現ベクターを導入を確認しsingle cell cloning を行っている。安定した細胞株が作成でき、今後は詳細についての解析が進展する。

次年度使用額が生じた理由

2018年度に病気療養のための入院等が有り、研究計画の遅れが生じた。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2018

すべて 学会発表 (2件) (うち国際学会 1件)

  • [学会発表] Down症候群乳歯歯根膜由来細胞のDYRK1A発現解析2018

    • 著者名/発表者名
      浅川 剛吉, 大川 真純, 永田 夏琳, 長谷川 智一, 宮本 洋一, 吉村 健太郎, 笹 清人, 馬目 瑤子, 杉山 智美, 上條 竜太郎, 島田 幸恵
    • 学会等名
      第55回 日本小児歯科学会
  • [学会発表] DSCR1 expression on periodontal ligament cell derived from Down syndrom2018

    • 著者名/発表者名
      Takeyoshi Asakawa, Yoichi Miyamoto, Atsushi Yamada, Kentaro Yoshimura, Sasa Kiyohito, Tomokazu Hasegawa*,Yoko Manome, Masumi Okawa, Masayasu Shiga. Tomomi Sugiyama, Ryutaro Kamijo and Yukie Shimada.
    • 学会等名
      96th International Association for Dental Research
    • 国際学会

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公開日: 2019-12-27  

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