| 研究課題/領域番号 |
16K11826
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
小林 宏明 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 非常勤講師 (50396967)
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| 研究分担者 |
片桐 さやか 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 助教 (60510352)
小田 茂 東京医科歯科大学, 歯学部附属病院, 准教授 (70160869)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | Thrombospondin-1 / ヒト歯根膜細胞 |
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| 研究実績の概要 |
歯周炎の疾患進行において、免疫応答と骨代謝には強い繋がりがある。我々は、DNAマイクロアレイによる探索と歯周炎局所での発現結果をもとに、Thrombospondin-1(TSP-1)が歯周炎の疾患進行に強く関与していることを発見し報告した。TSP-1は上皮細胞、骨芽細胞、破骨細胞、線維芽細胞などさまざまな細胞に影響を与える多機能マトリックスタンパクであり、歯周炎の病態形成において重要である骨破壊に対し、TSP-1がなんらかの役割を担っている可能性が考えられるが、歯根膜細胞に対するTSP-1の働きや、歯肉上皮細胞や歯肉線維芽細胞との関連、歯槽骨吸収に至るメカニズムへの影響には不明な点が多い。本研究では、TSP-1が歯周組織構成細胞に与える影響を探索し、特に歯根膜細胞に対しての作用を明らかにすることにより、歯周炎の骨代謝経路におけるTSP-1の役割を解明することである。
TSP-1は多機能マトリックスタンパクであり、その受容体ごとに働きが異なることが予想される。特にCD36受容体とCD47受容体により、そのシグナル伝達機構が異なる。そのため、歯周組織構成細胞におけるTSP-1受容体の発現を調べ、その受容体からのシグナルを解析することを本年度の目的とした。
倫理審査委員会での審査後に、研究を開始した。ヒト歯根膜細胞は、東京医科歯科大学に通院中の患者で、本実験に署名で同意の得られた患者さんの抜去歯表面から回収した。歯根根尖側１/３から歯根膜細胞を回収し、酵素処理法にて歯根膜細胞初代培養株を入手し使用した。現在、免疫染色により、CD36とCD47の発現を計測している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
倫理審査委員会の審査後に研究を始めたため、時間がかかっている。また、抜去歯の回収にも時間がかかっている。しかしながら歯根膜細胞のプライマリーカルチャーは順調に進んでいる。全体としては、おおむね研究計画どうりに進んでいる。
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| 今後の研究の推進方策 |
ヒト歯根膜細胞におけるCD36とCD47の発現を、mRNAレベルとタンパクレベルで測定する。また、ひと歯根膜細胞に炎症性の刺激を加えて、炎症状態におけるCD36,CD47発現の変化を計測する。
次に、ヒト歯根膜細胞に対しRecombinant Human TSP-1 protein CFによる刺激実験を行う。TSP-1刺激後にひと歯根膜細胞の変化をDNAアレイを用いて、網羅的な解析を行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
初年度で使用予定であった、mRNA発現解析が次年度にまわったため、予算を次年度にまわしている。
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| 次年度使用額の使用計画 |
mRNA発現解析を行う予定である。
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