| 研究実績の概要 |
平成29年度は多様な環境で生育する微生物を用いて細胞内の8-OH-dG の生成と抑制に関し、以下の研究項目を実施した。菌株は次の略号で示す。EC:Escherichia coli K-12, BS:Bacillus subtilis 168, SP:光合成細菌Synechocystis sp. PCC6803, CA:絶対嫌気性菌Clostridium acetobutylicum ATCC824, LR:偏性嫌気性菌Lactobacillus reuteri JCM112, PS:深海由来低温細菌Psudoalteromonas sp. PS1M3。(1) 酸化損傷塩基8-OH-dGの細胞内蓄積量と自然突然変異率の解析:EC, LR, PSにおいて至適温度より低温培養時において 細胞内の8-OH-dG量が増大した。また、酸素無添加培養時におけるCAとLRはいずれも低温培養時において細胞内の8-OH-dG量 が増大し、細胞内酸素濃度が極めて低い場合でも細胞内で酸化ラジカル反応により8-OH-dGが生成されていることが判明した。しかしながら、いずれの細菌においても低温培養時における自然突然変異率はいずれも顕著な増大は見られなかった。一方、深海由来低温細菌PSについては通常培養温度より高い温度において、8-OH-dG量が低温培養時より低いにもかかわらず、自然突然変異率が顕著に増大することが判明した。(2) 8-OH-dGの分解に関わるMutTおよび除去に関わるMutM,MutYの温度特性に関する解析:使用菌株からmutT遺伝子を同定することを試みた。嫌気性細菌LRからmutTホモログを３遺伝子、CAから８遺伝子選択し、同定を試みたがいずれも遺伝的に大腸菌mutT変異株を相補しなかった。一方、光合成細菌PS及び深海由来低温細菌PSからはmutT遺伝子の同定に成功した。
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