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2018 年度 実施状況報告書

DNA2重鎖と脂質ラフトモデル膜を用いた微弱磁場イメージング・システムの構築

研究課題

研究課題/領域番号 16K13980
研究機関大分大学

研究代表者

岡 芳美  大分大学, 全学研究推進機構, 助教 (30470115)

研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2020-03-31
キーワードラジカルペア / 微弱磁場センシング / クリプトクロム・モデル / 脂質ラフトモデル / DNA2重鎖
研究実績の概要

青色光受容体タンパク質クリプトクロムの磁気センシングに着目して、微弱磁場をセンシングできる人工システムの構築を目指した。フラビンの1重項励起状態からのフラビン-トリプトファン・1重項ラジカルペア形成の過程の実現、最終的な3重項ラジカルペアの長寿命化の実現のため、DNAモデルシステムの構築を進めている。オリゴマー末端のパルミトイル修飾により、脂質ラフト相(厳密には、脂質ラフトモデル膜の秩序液体相)を反応場とするフラビンの蛍光消光、寿命を顕微下で定量的に評価できるシステムを構築し、イメージングが可能な材料システムの探索、磁気センシング機能評価へと繋げる計画である。パルミトイル修飾したトリプトファン含有ペプチド核酸(PNA)オリゴマーとフラビンを含有する相補的なPNAオリゴマーの2重鎖を用いた場合、脂質ラフトモデル膜の秩序液体相と無秩序液体相の境界で破壊現象が起こることを顕微下で観測した(2017年度に論文発表済み)。パルミトイル修飾したトリプトファン含有ペプチド核酸(PNA)オリゴマーと(フラビンの代わりに)Alexa Fluor 488(AL488)を含有する相補的なDNAオリゴマーの2重鎖を用いた場合には、上記のような破壊現象は起こらず、秩序液体相中でAL488の蛍光消光、寿命を顕微下で評価できている(2017年度に論文発表済み)。上記AL488をフラビンに置き換えたDNAオリゴマーを合成したが、このDNA自体の水に対する溶解性が低く、PNAと2重鎖を形成させにくいことが分かった(2018年度に学会発表済み)。フラビン含有DNAオリゴマーの水溶性の向上、脂質ラフトモデル膜内でPNAと2重鎖を形成させることを目的に、リンカー構造の検討を進めている。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

入手したいオリゴデオキシリボヌクレオチド(ODN)の合成が遅れているため。

今後の研究の推進方策

当初、ボトムアップ的に研究遂行を計画したが、入手したいオリゴデオキシリボヌクレオチド(ODN)の合成が遅れているため計画を見直した。昨年度中に、関連する論文発表ができたこともあり、トップダウン的に脂質ラフトモデル膜方向から研究を遂行する方針に変更した。研究実績の概要に記述したが、フラビン含有DNAオリゴマーの性質として、予想以上に水に対する溶解性が低いことが分かってきた。その向上のため、リンカー構造の検討を行い、現在までに構築できているシステムを最大限利用し「脂質ラフトモデル膜を用いた微弱磁場イメージング・システムの構築」を目指す。

次年度使用額が生じた理由

測定のための旅費、成果発表旅費は他予算を利用したため、次年度使用額が生じた。その使用計画としては、オリゴデオキシリボヌクレオチド(ODN)合成に必要な試薬の購入費や旅費、英文校正費用等に充てたいと考えている。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2019 2018

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (2件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] Gigantic Magnetic Field Effect on the Long-Lived Intermolecular Charge-Separated State Created at the Nonionic Bilayer Membrane2018

    • 著者名/発表者名
      Miura Tomoaki、Maeda Kiminori、Oka Yoshimi、Ikoma Tadaaki
    • 雑誌名

      The Journal of Physical Chemistry B

      巻: 122 ページ: 12173~12183

    • DOI

      10.1021/acs.jpcb.8b08389

    • 査読あり
  • [学会発表] Construction of Artificial Flavoproteins in a Mimicking Cell Membrane as a Reaction Field2019

    • 著者名/発表者名
      岡 芳美
    • 学会等名
      日本化学会第99春季年会
  • [学会発表] Probe Aggregation into the Interfaces between Mimicking Raft and Non-Raft Domains, Induced by Peptide Nucleic Acid (PNA) Duplexes2018

    • 著者名/発表者名
      Oka Yoshimi
    • 学会等名
      The 256th ACS National Meeting
    • 国際学会

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公開日: 2019-12-27  

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