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本研究は、CRISPR/Cas9を用いてマウス小脳全域のプルキンエ細胞特異的に特定の遺伝子をノックアウトし、登上線維のシナプス刈り込みに関わる分子のスクリーニング系の確立を目的とした。条件検討の結果、胎生11日齢の両側小脳への2点電極を用いた子宮内エレクトロポレーション法が小脳全域への導入効率が良いと判明した。登上線維シナプスの刈り込みに必須な遺伝子をターゲットとして、小脳スライス標本を用いて電気生理学的にシナプス刈り込みへの影響を調べたが、SpCas9もeSpCas9も共に顕著なシナプス異常は見られなかった。今回の条件では遺伝子導入には成功したが、ゲノム編集の効率が低い可能性が示唆された。
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