| 研究課題/領域番号 |
16K14697
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
樹下 成信 岡山大学, 自然生命科学研究支援センター, 助教 (60646917)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | 小胞容量測定 / 小胞型神経伝達物質トランスポーター |
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| 研究実績の概要 |
これまでのシナプス小胞の容量変化は電気生理学的手法を用いて神経刺激による開口放出を行う方法で測定されてきた。しかし、小胞型神経伝達物質トランスポーターをノックアウトしたシナプス小胞を用いていた事から、経時的な容量変化を定量できなかった。
本研究で用いる方法では、容量変化と、粒子数を同時に計測することができる。濃縮する基質濃度やイオン濃度はRI標識化合物を用いて解析できる事から、これまで明らかにされていなかった、神経伝達物質濃縮量と、容量変化量を定量的に明らかにできる。
シナプス小胞に存在するトランスポーターやイオンチャネルはV-ATPaseがATPを加水分解する事で作り出す、H+の電気化学的ポテンシャルを駆動力として、神経伝達物質の濃縮や、イオン循環を行っている。しかし、これまでの研究では、容量変化については考慮されていない。応募者の研究は新たな物理定数を定義する上での先駆けとなる。
これまでの研究により、シナプス小胞の粗分画を用いて、駆動力を作り出すATP及び神経伝達物質の添加による粒子径変化とその粒子数の分布に観察する事に成功した。つまり、駆動力を作り出すATP及び神経伝達物質の添加による粒子径変化とその粒子数の分布に観察する事に成功した。これは、伝達物質の取り込みに従う浸透圧変化を示している。
この変化は、生体から取り出した様々な小胞や顆粒の全てで起こっており、今後の研究展開につながる研究となった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
これまで様々な生体試料を用いた、小胞容量測定を行なってきた。これにより、全ての小胞、顆粒において、容量変化を確認することができたとともに、より、高純度の顆粒、小胞精製法を確立した。これにより、次年度以降の解析につながる研究となることから。
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| 今後の研究の推進方策 |
研究により、生体試料を用いた解析が可能となったことから、ATPの加水分解エネルギーや神経伝達物質の取り込みとそれに伴うイオン量変化を測定することが可能となった。今後は、変化を担うイオン輸送体、機能未知なオーファントランスポーターを同定し、そのチャネルもしくはトランスポーターの機能を明らかにしていく。
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