研究課題
次世代育種技術シスジェネシスを利用し、有用園芸作物を開発するためには、膨大な植物遺伝子機能情報をもとに、作物やその近縁種から有用遺伝子を同定する技術が求められるが、その効率的特定スキームは確立されていない。本研究ではモデル植物等で現在までに得られた植物ウイルス抵抗性遺伝子の機能情報をもとに、トマト近縁種から植物ウイルスに対する抵抗性遺伝子を同定し、シスジェネシスによりウイルス抵抗性トマトを作出を目指す。平成２８年度はトマトの重要病害であるペピーノモザイクウイルスについて効率的なウイルス接種系、抵抗性評価系の確立を目的として研究を実施した。ペピーノモザイクウイルスはトマトに果実の奇形、葉のモザイクなどの病徴を引き起こし、果実や種子を通じて伝搬する植物ウイルスである。1999年にオランダのトマトに発生したのを皮切りに、約10年で世界中に感染範囲を拡大したエマージング病害であり、本ウイルスに対する抵抗性品種は皆無である。ペピーノモザイクウイルスの全長cDNAを植物形質転換用のバイナリーベクターに導入した上で、プロモーター・ターミネーターの条件検討を行い、ペピーノモザイクウイルスの感染ベクターを構築した。同ベクターをアグロバクテリウムに形質転換した上でトマトにインフィルトレーション法により接種したところ、２週間後にウイルスの病徴が認められた。また、ウイルス特異的なRT-PCRによりペピーノモザイクウイルスの感染を確認した。
3: やや遅れている
効率的なウイルス抵抗性品種のスクリーニングを行うため、GFP遺伝子を導入したペピーノモザイクウイルス感染性クローンの構築を目指したが成功しなかったため。
GFP発現ペピーノモザイクウイルスベクターの構築を継続するがうまくいかない場合は、感染性クローンを用いたスクリーニングを進める。
平成２８年度中にペピーノモザイクウイルスのGFPベクターを構築し、効率的なスクリーニングを行う予定であったが構築に至らなかったため、次年度使用額が発生した。
GFP発現ベクターの構築を継続するが、うまくいかない場合は感染性クローンを用いてスクリーニングを進める。
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すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 2件)
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