| 研究実績の概要 |
本研究では、間葉系幹細胞 (MSC) を難治性神経変性疾患の再生医療・細胞治療に応用することを目的として、治療効果の高いMSC亜集団の同定を目指す。マウス緻密骨あるいは脂肪組織から、MSCのマーカーとなることが報告されているCD73, CD105, CD106等の各種細胞表面マーカーを指標にMSCの亜集団を免疫磁気分離法により分離して、それらをプリオン感染マウスに移植して、生存期間の延長を指標に治療効果の高いMSC亜集団を特定を目指す。
マウス緻密骨あるいは脂肪組織から、プラスチック付着性細胞を分離後、単球系細胞および造血幹細胞を除くために、免疫磁気分離法 (MACS) により、CD11bおよびCD45陰性の細胞集団を回収した。mMSCのマーカーとなることが報告されている分子である, CD29 , CD44 , CD73, CD90.2, CD105 , CD106 のうち、CD105の発現が緻密骨と脂肪組織で異なることから、これら由来の異なるmMSCsの治療効果を検討した。
プリオンChandler株感染マウスの海馬にｍMSCsを移植したところ、緻密骨由来mMSCsを移植したマウスでは、生存期間が168日（陰性対照：155日）と有意に延長した。一方、脂肪組織由来mMSCsを移植したマウスでは、生存期間が154日（陰性対照：155日）と延長は認められなかった。緻密骨由来mMSCsを移植したマウスでは生存期間は延長したが、異常型プリオンタンパク質の蓄積は、非移植陰性対照のプリオン感染マウスと差が認められなかった。
緻密骨由来mMSCsではCD105の発現が認められたが、脂肪組織由来mMSCsでは殆ど発現ししていないことから、CD105陽性のmMSCs集団が、プリオン病に対する治療効果を有する可能性が示唆された。
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| 今後の研究の推進方策 |
緻密骨由来mMSCsからMACSによりCD105陽性集団を回収して、CD105陰性の細胞集団との治療効果の差を調べる。治療効果に差が認められた場合、当初予定していた、次世代シークエンサーによる網羅的遺伝子発現解析を実施して、CD105陽性あるいは陰性mMSCsの相違を比較検討する。また、MSCsのなかで、特に幹細胞性が高い細胞として、MUSE細胞と呼ばれる、CD140a (PDGFR) を発現する細胞集団の存在が報告されている (Houlihan et al., Nat Protocol, 2013)。緻密骨から分離したmMSCs中でCD140a陽性となる細胞集団は非常に少なくMACSで分離することができないが、セルソーターを用いて分離を試み、プリオン病に対する治療効果を検討する。
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