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2017 年度 実施状況報告書

ウマにおける移植医療の発展に向けた歯髄幹細胞のバンク化

研究課題

研究課題/領域番号 16K15048
研究機関鹿児島大学

研究代表者

帆保 誠二  鹿児島大学, 農水産獣医学域獣医学系, 教授 (60446507)

研究分担者 石川 真悟  鹿児島大学, 農水産獣医学域獣医学系, 助教 (00755887)
三角 一浩  鹿児島大学, 農水産獣医学域獣医学系, 教授 (10291551)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
キーワード間葉系幹細胞 / 歯髄由来幹細胞 / MHCハプロタイプ
研究実績の概要

前年度までに保存していたDP-MSCの生存率について解析を行ったところ、市販の細胞保存液に保存したもので生存率が90%を超えていた。さらに、その増殖能・分化能についても凍結前の性質が保存されていた。市販の細胞保存液は、GMPに準拠した製造管理及び品質管理がなされており、品質が安定していることもから、これ以上の保存液・保存技術の検討は必要ないと考えた。以上から、DP-MSCの分離・培養・保存法を確立することができたが、一方で、DP-MSCの分離に用いる狼歯は萌出していない個体も多く存在するため、オーダーメイド治療のためのバンク化は困難であるという問題が残されていた。そこでその解決のために、人の骨髄バンク等と同様な主要組織適合抗原(MHC)のハプロタイプを一致させた他家移植を行うことができないかという発想に至った。ウマ、特にサラブレッドは「三大始祖」と呼ばれる3頭の馬に祖先をたどることができることからも、遺伝的多様性があまり大きくないことが予想され、MHCハプロタイプを合わせたレディーメイドな移植医療も他の動物種に比べて容易であることが期待される。そこで、海外ですでに報告があるマイクロサテライトマーカーを用いたウマMHCハプロタイピングについて検討した結果、本国のサラブレッドにおいても同様の方法でタイピングすることに成功した。また、本国のサラブレッド82頭においてタイピングを行った結果、ヒトでは数万人に一人と言われている父親と母親から同一のハプロタイプを受け継いだ、移植医療において有用なホモ型ハプロタイプを有する個体が5頭も存在していた。以上から、ハプロタイプを合わせた他家移植はサラブレッドにおいて有用であることが期待され、バンク化のためにMHCハプロタイピングについて更なる検討が必要であると考えられた。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当初計画していた研究はほぼ完遂することができた。
現在はバンク化のための新たな課題について検討を重ねており、目的である「幹細胞バンク」の設立のためにMHCハプロタイピングについて研究を推進していく。

今後の研究の推進方策

平成29年度までのDP-MSCの分離・培養・保存法についての研究を一層深めつつ、バンク化のための課題であるMHCハプロタイピングについてより詳細な解析を行っていく。また、将来的なバンク設立のための採材も並行して進めて行く。

次年度使用額が生じた理由

これまでにウマ歯髄幹細胞(MSC)の分離・培養法を確立し,移植医療に必要な幹細胞の性質解析を行ってきた。幹細胞の性質解析において,当初は① MSC としての特徴を維持している,② 有用なサイトカインの産生能が維持されている,③ DNA 損傷が少ない,ことを中心に解析する予定であった。しかし ,新手法として主要組織適合抗原ハプロタイピングを実施可能となったことから研究期間の延長を希望し,予算を次年度に残した。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2017

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Isolation and characterization of equine dental pulp stem cells derived from Thoroughbred wolf teeth2017

    • 著者名/発表者名
      ISHIKAWA Shingo、HORINOUCHI Chie、MURATA Daiki、MATSUZAKI Shota、MISUMI Kazuhiro、IWAMOTO Yohei、KOROSUE Kenji、HOBO Seiji
    • 雑誌名

      J Vet Med Sci

      巻: 79 ページ: 47~51

    • DOI

      10.1292/jvms.16-0131

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Isolation of equine peripheral blood stem cells from a Japanese native horse2017

    • 著者名/発表者名
      ISHIKAWA Shingo、HORINOUCHI Chie、MIZOGUCHI Ryugo、SENOKUCHI Asuka、KAMIKAKIMOTO Rie、MURATA Daiki、HATAZOE Takashi、TOZAKI Teruaki、MISUMI Kazuhiro、HOBO Seiji
    • 雑誌名

      J Equine Sci

      巻: 28 ページ: 153~158

    • DOI

      10.1294/jes.28.153

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] マイクロサテライトを用いた日本のサラブレッドにおけるMHC ハプロタイプの推定2017

    • 著者名/発表者名
      石川真悟、瀬之口明音、戸崎晃明、佐藤文夫、帆保誠二
    • 学会等名
      日本ウマ科学会学術集会

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公開日: 2023-03-23  

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