2018 年度研究成果報告書

iPS細胞技術とゲノム編集を用いた効率のよいがん特異的キラーT細胞の再生

研究課題

PDF

研究課題/領域番号	16K15215
研究種目	挑戦的萌芽研究
配分区分	基金
研究分野	医化学一般
研究機関	滋賀医科大学
研究代表者	縣保年滋賀医科大学, 医学部, 教授 (60263141)
研究協力者	河本宏
研究期間 (年度)	2016-04-01 – 2019-03-31
キーワード	がん免疫 / がん抗原 / Ｔ細胞受容体（TCR） / iPS細胞 / 再生医療 / ゲノム編集 / CRISPR/Cas9 / カセット交換法（RMCE）
研究成果の概要	本研究では、がん抗原特異的なＴ細胞受容体（TCR）遺伝子をiPS細胞の内在性TCRβ遺伝子座へノックインすることにより、活性の高いT細胞を効率よく再生することを目的とした。まずJurkat細胞をモデルとして、ゲノム編集により薬剤耐性遺伝子カセットを内在性TCRβ遺伝子座へノックインし、次にCre/loxPシステムを用いたカセット交換法により、TCR遺伝子と交換させ発現させることに成功した。そこでiPS細胞で同様の実験を行ったところ、カセット交換で問題があったが、プロモーターを改良することで再現性よく交換ができるようになった。現在、カセット交換できたiPS細胞を用いてT細胞の再生を試みている。
自由記述の分野	分子生物学、免疫学
研究成果の学術的意義や社会的意義	本研究では、がん抗原特異的なTCR遺伝子をiPS細胞の内在性TCRβ遺伝子座へノックインすることに成功した。このiPS細胞から活性の高いT細胞を再生することができれば、カセット交換法により未知変異抗原に反応するTCR遺伝子をノックインしたiPS細胞を次々に作製することも可能となり、細胞製剤として早期の治療応用も期待できる。またレンチウイルスを用いた遺伝子挿入によるがん化のリスクも回避できることから安全性においても有意義である。