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前年度までに、５つのクローディンをゲノム編集によって欠失させることによりタイトジャンクションを失ったMDCKII細胞を樹立した。この細胞に、欠失させた5つのクローディンサブタイプをそれぞれ単独で外来的に発現させた結果、いずれの場合でも、各サブタイプ単独で機能的なタイトジャンクションが再構成されることを明らかにした。すなわち、MDCKII細胞で多数のクローディンサブタイプが共発現する意味として、機能的なタイトジャンクションの形成に複数のサブタイプ化の協奏的作用が必要かもしれないとの仮説は正しくないことがわかった。さらに、５つのクローディンサブタイプを順次欠失させる過程で、クローディン２，４，３，７の４つを欠失させた時点で、タイトジャンクションのストランド構造の形成が貧弱で不十分であり、上皮バリア機能が大きく低下していることがわかった。先述の結果と合わせると、内在的に発現するクローディン１だけではMDCKII細胞でタイトジャンクションを形成するためのクローディン量が不十分であることを意味する。また、上記クローディン欠失細胞において前年度に見出された新規細胞密着部位の詳細な解析を行った結果、この構造が高分子量のトレーサーの透過に対してバリア機能を有することを見出した。このことはタイトジャンクションが、１）クローディンが形成するタイトジャンクションストランド構造を基盤とする電解質等少分子に対するバリア構造と、２）何らかの接着分子が構成する高分子量分子の透過に対するバリア機能を有する細胞膜密着部位、という２つの要素から構成されることを示唆する。
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