シグナル伝達抑制による新規抗ウイルス戦略への挑戦

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K15258
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 松川 昭博 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (90264283)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: MAPKシグナル伝達 / シグナル伝達抑制

研究実績の概要

1) Cell-penetrating peptide (CPP)-Spred2の作成と効果検証：CPPとして、HIV-1のTatタンパク質由来の塩基性ペプチド（TAT：GRKKRRQRRRPPQ)をRaf結合部位（Spred2はRafに結合して、Raf-Ras-ERK-MAPKを抑制する）が近いC末端側に組込んだ遺伝子組換体（pET21a h-spred2-TAT）を作製し、大腸菌で大量発現させた。通常の可溶性タンパクとして抽出が困難であったため、封入体可溶化し、His-tag精製を行い、dropping法でリフォールディングして濃縮してTAT-spres2タンパクを得た。得られたTAT-Spred2をH1993細胞およびHepG2細胞に添加したところ、いずれでもSpred2タンパクの強発現を確認できた。しかし、ERK活性化は抑制できず、また、Ras-Raf-ERK活性阻害で起こるべき細胞増殖抑制も確認できなかった。FGF刺激により、Raf-Ras-ERK-MAPK活性化を誘導した状況でも、同様の結果であった。以上より、作製したTAT-Spred2タンパクは細胞内には導入されるものの、その機能を発揮しないと判断した。
２）Spred-2過剰発現によるインフルエンザ感染抑制 ：Spred-2過剰発現マウスにH1N1/PR8の感染実験を行ったが、現時点で感染肺の重症度に大きな違いを見ていない。
３）ヒト肺線維症肺を用いての検討：ブレオマイシン（Bleomycin）誘導肺線維症はSpred2欠損マウスで軽減する。そこで、肺線維症患者の摘出肺でのSpred2発現量を、非線維症肺を対照として比較検討したところ、肺線維症肺では、Spred2発現量は有意に高値を示した。内因性Spred2は線維化に対して対症的に発現上昇し、線維化抑制に働くものの、発現量が不十分である可能性がある。

研究成果

• [雑誌論文] Spred2 Regulates High Fat Diet-Induced Adipose Tissue Inflammation, and Metabolic Abnormalities in Mice (2019)
  • 著者名/発表者名: Ohkura T, Yoshimura T, Fujisawa M, Ohara T, Marutani R, Usami K, Matsukawa A
  • 雑誌名: Front Immunol 巻: 10 ページ: 17
  • DOI: 10.3389/fimmu.2019.00017
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Abrogated Caveolin-1 expression via histone modification enzyme Setdb2 regulates brain edema in a mouse model of influenza-associated encephalopathy (2019)
  • 著者名/発表者名: Imakita N, Kitabatake M, Ouji-Sageshima N, Hara A, Morita-Takemura S, Kasahara K, Matsukawa A, Wanaka A, Mikasa K, Ito T
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 9(1) ページ: 284
  • DOI: 10.1038/s41598-018-36489-8
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A Novel Combination Cancer Therapy with Iron Chelator Targeting Cancer Stem Cells via Suppressing Stemness (2019)
  • 著者名/発表者名: Katsura Y, Ohara T, Noma K, Ninomiya T, Kashima H, Kato T, Sato H, Komoto S, Narusaka T, Tomono Y, Xing B, Chen Y, Tazawa H, Kagawa S, Shirakawa Y, Kasai T, Seno M, Matsukawa A, Fujiwara T
  • 雑誌名: Cancers (Basel) 巻: 11(2) ページ: 177
  • DOI: 10.3390/cancers11020177
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Combined effect of the anti-high mobility group box-1 monoclonal antibody and peramivir against influenza A virus-induced pneumonia in mice (2019)
  • 著者名/発表者名: Hatayama K, Nosaka N, Yamada M, Yashiro M, Fujii Y, Tsukahara H, Liu K, Nishibori M, Matsukawa A, Morishima T
  • 雑誌名: J Med Virol 巻: 91(3) ページ: 361-369
  • DOI: 10.1002/jmv.25330
  • 査読あり
• [雑誌論文] The relationship between the PD-L1 expression of surgically resected and fine-needle aspiration specimens for patients with pancreatic cancer. (2019)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto K, Ohara T, Fujisawa M, Takaki A, Takahara M, Tanaka N, Kato H, Horiguchi S, Yoshida R, Umeda Y, Fushimi S, Yagi T, Matsukawa A, Okada H
  • 雑誌名: J Gastroenterol. 巻: Apr 29 ページ: -
  • DOI: 10.1007/s00535-019-01586-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] SOCS3 overexpression in T cells ameliorates chronic airway obstruction in a murine heterotopic tracheal transplantation model. (2019)
  • 著者名/発表者名: Mesaki K, Yamane M, Sugimoto S, Fujisawa M, Yoshimura T, Kurosaki T, Otani S, Oto S, Matsukawa A, Toyooka S
  • 雑誌名: Surgery Today 巻: 49(5) ページ: 443-450
  • DOI: 10.1007/s00595-018-1753-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel, nontoxic iron chelator, super-polyphenol, effectively induces apoptosis in human cancer cell lines (2018)
  • 著者名/発表者名: Ohara T, Tomono Y, Boyi X, Yingfu S, Omori K, Matsukawa A
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 9(67) ページ: 32751-32760
  • DOI: 10.18632/oncotarget.25973
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Ovarian stromal cells as a source of cancer-associated fibroblasts in human epithelial ovarian cancer: A histopathological study (2018)
  • 著者名/発表者名: Fujisawa M, Aye Moh-Moh-Aung, Zeng Z, Wani Y, Matsukawa A.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 13(10) ページ: e0205494
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0205494
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] SPRED2 deficiency may lead to lung ischemia-reperfusion injury via ERK1/2 signaling pathway activation (2018)
  • 著者名/発表者名: Okada M, Yamane M, Yamamoto S, Otani S, Miyoshi K, Sugimoto S, Matsukawa A, Toyooka S, Oto T, Miyoshi S
  • 雑誌名: Surg Today 巻: 48(12) ページ: 1089-1095
  • DOI: 10.1007/s00595-018-1696-x
  • 査読あり
• [学会発表] Ras-Raf-ERK/MAPK経路とその制御因子Spred2による炎症・がんの制御 (2018)
  • 著者名/発表者名: 松川昭博
  • 学会等名: 第107回日本病理学会学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] Spred-2 protects mice from ConA-induced liver injury. (2018)
  • 著者名/発表者名: Sun C, Yshimura T, Fujisawa M, Ohara T, Yang Xu, Matsukawa A
  • 学会等名: 第107回日本病理学会学術集会
• [学会発表] Spred2 deficiency exacerbates visceral adipose tissue inflammation and insulin resistance in mice. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ohkura T, Marutani R, Yoshimura T, Fujisawa M, Ohara T, Matsukawa A
  • 学会等名: 第107回日本病理学会学術集会
• [学会発表] MiRNA-200b-3p may play a role in angiogenesis of hepatocellular carcinoma by targeting ERG (2018)
  • 著者名/発表者名: Moh-Moh-Aung A. Fujisawa M, Yoshimura T, Matsukawa A
  • 学会等名: 第107回日本病理学会学術集会
• [学会発表] The role of tumor cell-derived GM-CSF in the progression of 4T1 murine breast cancer. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshimura T, Nakamura K, Sato M, Li C, Fujisawa M, Mukaida N, Matsukawa A
  • 学会等名: 第107回日本病理学会学術集会
• [学会発表] ヒト卵巣癌における線維芽細胞の由来 (2018)
  • 著者名/発表者名: 藤澤真義、柳井広之、和仁洋治、伏見聡一朗、松川昭博
  • 学会等名: 第107回日本病理学会学術集会
• [学会発表] ブレオマイシン肺線維症モデルにおけるSpred-2の役割 (2018)
  • 著者名/発表者名: 河原明奈、水田亮、藤澤真義、吉村禎造、松川昭博
  • 学会等名: 第107回日本病理学会学術集会
• [学会発表] 肺腺癌におけるSpred2の役割の解明 (2018)
  • 著者名/発表者名: 太田陽子、藤澤真義、吉村禎造、Wayan SI, 阪口政清、豊岡伸一、松川昭博
  • 学会等名: 第107回日本病理学会学術集会
• [学会発表] 胎児期に一過性骨髄異常増殖症を発症し胎盤にfetal thrombotic vasculopathyを伴ったダウン症候群の1例 (2018)
  • 著者名/発表者名: 濱崎友洋、藤澤真義、伏見聡一郎、堀田真智子、苗村智、和仁洋治、宮原宏幸、吉村禎造、松川昭博
  • 学会等名: 第107回日本病理学会学術集会
• [学会発表] Spred2 deficiency exacerbates adipose tissue inflammation and systemic insulin resistance in mice (2018)
  • 著者名/発表者名: Ohkura T, Yoshimura T, Matsukawa A
  • 学会等名: 第47回日本免疫学会学術集会
• [産業財産権] 徐放性デバイス (2018)
  • 発明者名: 松川昭博、菅生健
  • 権利者名: 松川昭博、菅生健
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2018-011901