| 研究課題/領域番号 |
16K15322
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
有馬 英俊 熊本大学, 大学院生命科学研究部(薬), 教授 (50260964)
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| 研究分担者 |
本山 敬一 熊本大学, 大学院生命科学研究部(薬), 准教授 (50515608)
東 大志 熊本大学, 大学院先導機構, 准教授 (20613409)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | ゲノム編集 / 家族性アミロイドポリニューロパチー / シクロデキストリン / デンドリマー / 結合体 / トランスサイレチン / CRISPR/Cas9システム / 肝臓 |
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| 研究実績の概要 |
本研究では、肝臓の遺伝子疾患（難病）であるトランスサイレチン型家族性アミロイドポリニューロパチー（ATTR－FAP）に対する根治療法としてのゲノム編集技術の開発を目的に、我々が構築した肝実質細胞特異的非ウイルスベクターであるLac-a-CDE(G3)およびPEG-LaC(G3)を用いて、ゲノム編集DNA（TTR-CRISPR pDNA）の肝臓特異的な送達を試みた。得られた結果を次に示す。１）Lac-a-CDE(G3)およびPEG-LaC(G3)は、TTR-CRISPR pDNAと静電的相互作用により複合体を形成した。２）Lac-a-CDE(G3)複合体およびPEG-LaC(G3)複合体は、ヒト肝がん由来細胞株HepG2細胞に、アシアロ糖タンパク質受容体を介して取り込まれることが示された。３）Lac-PaC複合体およびPEG-LaC(G3)複合体は、HepG2細胞において、TTR mRNA発現およびTTRタンパク質の発現を顕著に抑制し、またそれらの抑制効果は、Lac-PaC複合体およびPEG-LaC(G3)複合体間において同等であることが示唆された。４）Lac-PaC複合体およびPEG-LaC(G3)複合体は、ゲノム編集を介して TTR ノックアウトを誘導可能であることが示唆された。５）Lac-PaC複合体およびPEG-LaC(G3)複合体は上記実験条件下において、細胞障害性を示さないことが示された。これらの結果は、Lac-a-CDE(G3)/TTR-CRISPR pDNA複合体およびPEG-LaC(G3)/TTR-CRISPR pDNA複合体は、ゲノム編集に基づくATTR-FAPの治療としての可能性を示唆するものである。今後、ATTR-FAPモデルトランスジェニック（Tg）マウスを用いて、in vivoゲノム編集効果について検討する必要がある。
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