| 研究課題/領域番号 |
16K15380
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| 研究機関 | 和歌山県立医科大学 |
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研究代表者 |
牟礼 佳苗 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (90268491)
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| 研究分担者 |
竹下 達也 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20150310)
島袋 美絵 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (70776939)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | バイオマーカー / エクソソーム / miRNA |
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| 研究実績の概要 |
本研究は、地域住民コホートにおいて、加齢に関する疾患の共通発症基盤である血管内皮機能障害の初期過程の早期予知を可能とする鋭敏な予防医学的バイオマーカーの提示を目指している。
平成２８年度においては、全対象者について、PON1、PPARG、eNOS、PLA2G7等、血管内皮機能に関連する遺伝子の多型解析を終えた。
また、血管内皮機能指標として、酸化LDL受容体であるlectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1 (LOX-1)、炎症に関するphospholipase A2 (Lp-PLA2)、酸化ストレスマーカーである8-iso prostagrandin F2alpha (8-PGF2alpha)について、血清中および尿中量測定の予備実験を行った。
また、一部の対象者について、血中および尿中エクソソームを回収し、内包miRNAを抽出した。エクソソームの回収方法、miRNA抽出及び定量解析方法について検討した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
住民対象者において、非侵襲性動脈硬化指標は測定し終え、遺伝子型解析も終えている。
しかしながら、血清中および尿中における血管内皮機能関連マーカーの測定については、測定方法の予備実験を終えただけであり、さらに血中および尿中エクソソームの回収方法についても検討を終えた段階で、実際の対象者の検体についての測定を行えていないため、やや遅れていると考える。
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| 今後の研究の推進方策 |
当該年度で確立した方法を用いて、全対象者について血管内皮機能障害指標を解析し、抽出した対象者について、miRNAの解析を進め、血管内皮機能関連遺伝子型との相互作用機序解明について研究を進める。
さらに、平成２９年度では、ゲノム編集ツールであるCRISPR/Cas9システムを用い、ヒト正常組織由来細胞に一塩基置換を導入し、血管内皮機能関連遺伝子多型モデル細胞株シリーズの構築を目指す。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本研究で使用する予定の試薬について、本研究助成決定前に購入していた試薬を用いて予備実験を行ったため、当該年度では試薬を購入しなかったため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
申請時の計画どおり、血管内皮機能障害指標、血中および尿中エクソソーム内包miRNA解析用試薬購入に充てる。
また、ゲノム編集ツールであるCRISPR/Cas9システム、細胞購入を予定通り行う。
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