| 研究課題/領域番号 |
16K15447
|
|---|
| 研究機関 | 慶應義塾大学 |
|---|
研究代表者 |
片岡 雅晴 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (20445208)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
|
| キーワード | 細胞分裂 / lincRNA / 心筋細胞 |
|---|
| 研究実績の概要 |
本研究では、いまだ未解明である成熟期心筋細胞での細胞周期調整のメカニズムに、long intergenic non-coding RNA (lincRNA)がどのように機能しているかを解明し、さらに心臓病態時の治療への発展性を模索することを目標とした。成体マウス心臓に心筋梗塞を作成して心筋からRNAを抽出し、lincRNAアレイを用いた網羅的なlincRNAスクリーニングを施行した。その結果、心臓に特異的に発現量が多く、心筋梗塞時に梗塞域近辺で大きく発現量の変動するlincRNAを1つに絞り込み、”linc-Heart”と名付けた。linc-Heartは、心臓特異的に高発現し、心筋梗塞では急性期の梗塞域近辺で発現量が低下した。また、胎生期心臓では発現量が低下しており、成長に伴い発現量が増加した。AAVベクターを用いてlinc-Heartを心臓に導入し大動脈縮窄手術(TAC)を施行したところ、コントロール群(AAV-Luciferase導入心臓)と比較し、linc-Heart導入心臓ではTAC術後の心拡大が著明に抑制され、その効果はlinc-Heartによる心筋細胞サイズの正常維持によることが判明した。linc-Heartによる心筋細胞の細胞増殖効果に注目したところ、細胞増殖マーカーph3陽性心筋細胞は、コントロール群では皆無だが、linc-Heart導入心臓のTAC術後急性期にはph3陽性細胞が高率に確認された。Aurora-B, Ki67等の細胞周期マーカーでも確認し、linc-Heart過剰発現によって、TAC後の成体期心筋細胞の細胞周期を再開させ、細胞増殖を誘導できることを実証した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
おおむね計画に沿って進捗しており、成果が得られていると考えている。
|
| 今後の研究の推進方策 |
現在は、AAVベクターによる成体心臓へのshRNAの導入を行い、loss-of-functionによる機能解析を進行中である。また今後はMeis1等の心筋細胞周期に関わるとされる因子の網羅的解析等によるlinc-Heartの心筋細胞周期調整のメカニズムをさらに詳細に探索していく予定である。また、将来的に発展させる研究内容として、ヒトにおけるlinc-Heartと同等の機能を持つlincRNAの追及を行い、将来的なヒト心疾患に対する治療への応用可能性を探る。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
(理由)研究成果が順調に上がっているが、ウイルスベクターの作製に伴う費用が一部当初計画より日程変更したために、次年度使用額が生じた。
(使用計画)linc-Heartがもたらす心筋細胞周期調整メカニズムの全容解明のため、次世代シークエンサーを用いたオミクス解析等を予定しており、今後使用していく予定である。
|
