可視化によるランゲルハンス島細胞の新規調節因子の探索

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K15495
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 中尾 一和 京都大学, 医学研究科, 特任教授 (00172263)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 膵ランゲルハンス島 / ゼブラフィッシュ / アルファ細胞 / ベータ細胞 / デルタ細胞 / 共焦点レーザー顕微鏡 / フローサイトメトリー / セルソーター

研究実績の概要

本研究では光学的に透明であるというゼブラフィッシュに対し、膵ランゲルハンス細胞の構成細胞であるα細胞、β細胞、δ細胞の各細胞に特異的な蛍光蛋白を発現する3重トランスジェニックゼブラフィッシュ（α細胞：gcgaプロモーター、mTurquoise、β細胞：insプロモーター、mCherry、δ細胞：sst2プロモーター、mVenus)を作成し解析することで生体のエネルギー代謝において特に重要な機能を持つ膵ランゲルハンス島細胞の量や比率の制御のための分子メカニズムに迫ろうとする試みである。膵ランゲルハンス島細胞の蛍光顕微鏡下の画像解析を5dpf(days post fertilization)、7dpf、9dpfにおこなった。これよりβ細胞数に対するα細胞数の割合は5dpfと比較して7dpf以降に急速に増加するということを明らかにした。さらに、5dpf、7dpf、9dpfの各時期における種々の膵島細胞の遺伝子発現を個別に検討するために、ゼブラフィッシュ膵島細胞のフローサイトメトリーによる解析およびセルソーターによる膵島細胞の採取に係る技術開発を行いこれに成功した。フローサイトメトリー及びセルソーターによるゼブラフィッシュの膵ランゲルハンス島細胞の解析は過去に報告はなく新規性が高い。今回の成果によって今後膵島細胞の正確な採取を行うことが可能となる。このことは従来検討が困難であった膵島内の細胞間相互作用・制御の分子メカニズムの解明につながる重要な技術であり、今後様々な関連する研究に寄与してゆくものである。

研究成果

• [雑誌論文] MiR30-GALNT1/2 Axis-Mediated Glycosylation Contributes to the Increased Secretion of Inactive Human Prohormone for Brain Natriuretic Peptide (proBNP) From Failing Hearts. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa Y, Nishikimi T, Kuwahara K, Fujishima A, Oka S, Tsutamoto T, Kinoshita H, Nakao K, Cho K, Inazumi H, Okamoto H, Nishida M, Kato T, Fukushima H, Yamashita JK, Wijnen WJ, Creemers EE, Kangawa K, Minamino N, Nakao K, Kimura T
  • 雑誌名: Journal of American Heart Association 巻: 6 ページ: e003601
  • DOI: 10.1161/JAHA.116.003601
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Endothelium-Derived C-Type Natriuretic Peptide Contributes to Blood Pressure Regulation by Maintaining Endothelial Integrity. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakao K, Kuwahara K, Nishikimi T, Nakagawa Y, Kinoshita H, Minami T, Kuwabara Y, Yamada C, Yamada Y, Tokudome T, Nagai-Okatani C, Minamino N, Nakao YM, Yasuno S, Ueshima K, Sone M, Kimura T, Kangawa K, Nakao K
  • 雑誌名: Hypertension 巻: 69 ページ: 286-296
  • DOI: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.116.08219
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Role of leptin in conditioned place preference to high-fat diet in leptin-deficient ob/ob mice. (2017)
  • 著者名/発表者名: Shimizu Y, Son C, Aotani D, Nomura H, Hikida T, Hosoda K, Nakao K
  • 雑誌名: Neuroscience letter 巻: 640 ページ: 60-63
  • DOI: 10.1016/j.neulet.2017.01.033
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] MOB1-YAP1/TAZ-NKX2.1 axis controls bronchioalveolar cell differentiation, adhesion and tumour formation. Oncogene (2017)
  • 著者名/発表者名: Otsubo K, Goto H, Nishio M, Kawamura K, Yanagi S, Nishie W, Sasaki T, Maehama T, Nishina H, Mimori K, Nakano T, Shimizu H, Mak TW, Nakao K, Nakanishi Y, Suzuki A
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1038/onc.2017.58
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Ablation of the N-type calcium channel ameliorates diabetic nephropathy with improved glycemic control and reduced blood pressure (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohno S, Yokoi H, Mori K, Kasahara M, Kuwahara K, Fujikura J, Naito M, Kuwabara T, Imamaki H, Ishii A, Saleem MA, Numata T, Mori Y, Nakao K, Yanagita M, Mukoyama M
  • 雑誌名: Scientific Report 巻: 6 ページ: 27192
  • DOI: 10.1038/srep27192.2016
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Overall safety and efficacy of high-dose and low-dose intravenous glucocorticoid therapy in patients with moderate-to-severe active Graves' ophthalmopathy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ueda-Sakane Y, Kanamoto N, Fushimi Y, Tanaka-Mizuno S, Yasuno S, Miura M, Sone M, Yasoda A, Okada T, Togashi K, Nakao K, Inagaki N
  • 雑誌名: Endocrinology Jornal 巻: 63 ページ: 703-14
  • DOI: 10.1507/endocrj.EJ16-0038
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Brain-specific natriuretic peptide receptor-B deletion attenuates high-fat diet-induced visceral and hepatic lipid deposition in mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yamashita Y, Yamada-Goto N, Katsuura G, Ochi Y, Kanai Y, Miyazaki Y, Kuwahara K, Kanamoto N, Miura M, Yasoda A, Ohinata K, Inagaki N, Nakao K
  • 雑誌名: Peptide 巻: 81 ページ: 38-50
  • DOI: 10.1016/j.peptides.2016.03.014
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] High incorporation of long-chain fatty acids contributes to the efficient production of acylated ghrelin in ghrelin-producing cells. (2016)
  • 著者名/発表者名: Bando M, Iwakura H, Koyama H, Hosoda H, Shigematsu Y, Ariyasu H, Akamizu T, Kangawa K, Nakao K
  • 雑誌名: FEBS Letter 巻: 590 ページ: 992-1001
  • DOI: 10.1002/1873-3468.12132
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Impaired adipogenic capacity in induced pluripotent stem cells from lipodystrophic patients with BSCL2 mutations. (2016)
  • 著者名/発表者名: Mori E, Fujikura J, Noguchi M, Nakao K, Matsubara M, Sone M, Taura D, Kusakabe T, Ebihara K, Tanaka T, Hosoda K, Takahashi K, Asaka I, Inagaki N, Nakao K: Impaired adipogenic capacity in induced pluripotent stem cells from lipodystrophic patients with BSCL2 mutations.
  • 雑誌名: Metabolism 巻: 62 ページ: 543-56
  • DOI: 10.1016/j.metabol.2015.12.015
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Establishment of Leptin-Responsive Cell Lines from Adult Mouse Hypothalamus (2016)
  • 著者名/発表者名: Iwakura H, Dote K, Bando M, Koyama H, Hosoda K, Kangawa K, Nakao K
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 11 ページ: e0148639
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0148639
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Reevaluation of anti-obesity action of mazindol and elucidation of its effect on the reward system. (2016)
  • 著者名/発表者名: Aotani D, Son C, Shimizu Y, Nomura H, Hikida T, Kusakabe T, Tanaka T, Miyazawa T, Hosoda K, Nakao K
  • 雑誌名: Neuroscience letter 巻: 633 ページ: 141-145
  • DOI: 10.1016/j.neulet.2016.09.014
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [図書] Q&A 生活習慣病の科学 Neo －京都大学健康市民講座 (2016)
  • 著者名/発表者名: 中尾一和
  • 総ページ数: -
  • 出版者: 京都大学学術出版会
• [図書] Academic Press (2016)
  • 著者名/発表者名: 錦見俊雄、桑原宏一郎、中川靖章、寒川賢治、中尾一和
  • 総ページ数: -
  • 出版者: Endocrinology of the Heart in Health and Disease: Integrated, Cellular, and Molecular Endocrinology of the Heart