AnnexinIIー癌周囲環境の相互作用と分泌因子による浸潤転移メカニズムの解明

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K15607
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 高野 重紹 千葉大学, 大学院医学研究院, 助教 (20436380)
• 研究分担者: 佐藤 守 千葉大学, 医学部附属病院, 特任准教授 (20401002) ; 吉富 秀幸 千葉大学, 大学院医学研究院, 准教授 (60375631) ; 宮崎 勝 国際医療福祉大学, 大学病院, 教授 (70166156) ; 酒井 望 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (70436385) ; 賀川 真吾 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (90507302)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 膵癌 / Annexin II / Tenascin C / 癌細胞ー間質相互作用 / 浸潤 / 転移

研究実績の概要

膵癌において膵癌細胞に発現するAnnexin II (ANX2)と、間質に発現するTenascin C (TNC)の相互作用が、膵癌進展に及ぼす役割について細胞実験による機能解析と臨床検体を用いた癌周囲環境下でのANX2-TNCの関連を検討した。
1) マウス膵前癌細胞株、マウスおよびヒト膵癌細胞株を用い、特異的siRNAによるANX2 knockdownと合成TNCを添加することにより、ANX2とTNCの相互作用について評価した。ANX2とTNCの相互作用は、マウス膵前癌細胞株ではWestern blotでE-cadherin発現減弱を認め、上皮系から間葉系への移行（EMT）を促した。
2) 次に、我々が開発した3D cell culture systemを用い、siRNAによるANX2発現抑制が膵癌細胞に及ぼす形態学的変化を起こすかを検討した。ANX2とTNCの相互作用は3D細胞培養で間葉系への形態変化を促進した。また機能解析としては、invasion assayではANX2とTNCの相互作用により浸潤能を促進し、pancreato-spereformation assayではANX2 knockdownによりsphere能の低下、TNC添加によりsphere能の増強がそれぞれ認められた。最後にAnoikis assayではANX2とTNCの相互作用によりanoikis耐性を促進した。
3) 膵癌切除標本のANX2とTNCの免疫染色では、ANX2/TNC高発現はリンパ節転移、遠隔転移、Stage、治癒切除術後の遠隔転移再発と有意な相関を認めた。
膵癌進展においてANX2と間質TNCが、癌の浸潤・転移に重要な上皮間葉系移行の促進、浸潤能、自己複製能、アノイキス耐性を調節している可能性を示し、ANX2-TNC axisが膵癌進展を抑える治療標的となりうることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Roles of Pin1 as a Key Molecule for EMT Induction by Activation of STAT3 and NF-κB in Human Gallbladder Cancer. (2019)
  • 著者名/発表者名: Nakada S, Kuboki S, Nojima H, Yoshitomi H, Furukawa K, Takayashiki T, Takano S, Miyazaki M, Ohtsuka M.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 巻: 26 ページ: 907-917
  • DOI: 10.1245/s10434-018-07132-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of annexin II and stromal tenascin C promotes epithelial to mesenchymal transition and correlates with distant metastasis in pancreatic cancer. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoneura N, Takano S, Yoshitomi H, Nakata Y, Shimazaki R, Kagawa S, Furukawa K, Takayashiki T, Kuboki S, Miyazaki M, Ohtsuka M.
  • 雑誌名: International Journal of Molecular Medicine 巻: 42 ページ: 821-830
  • DOI: 10.3892/ijmm.2018.3652
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Conversion surgery with gemcitabine plus nab-paclitaxel for locally advanced unresectable pancreatic cancer: A case report. (2018)
  • 著者名/発表者名: Okura R, Takano S, Yokota T, Yoshitomi H, Kagawa S, Furukawa K, Takayashiki T, Kuboki S, Suzuki D, Sakai N, Nojima H, Mishima T, Miyazaki M, Ohtsuka M.
  • 雑誌名: Molecular and Clinical Oncology 巻: 9 ページ: 389-393
  • DOI: 10.3892/mco.2018.1688
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Annexin II plays diverse functions during pancreatic cancer progression (2018)
  • 著者名/発表者名: Shigetsugu Takano, Shingo Kagawa, Naoko Yoneura, Hideyuki Yoshitomi, Fumio Nomura*, Masayuki Ohtsuka
  • 学会等名: 第７７回 日本癌学会学術総会