| 研究課題/領域番号 |
16K15639
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| 研究機関 | 弘前大学 |
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研究代表者 |
麓 敏雄 弘前大学, 医学研究科, 助教 (80463206)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| キーワード | 発現ベクター |
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| 研究実績の概要 |
SDラットのThymusおよびSpleenよりmRNAを抽出し、RT-PCRによりThromboxane A2 receptorおよびProstaglandin I2 receptor cDNAを増幅し、pcDNA3ベクターにクローニングした。
Thromboxane A2 receptorのC末端にPCRによって増幅したEYFP遺伝子をつなぎ、さらに細胞内ループ領域1にRluc遺伝子を挿入したプラスミドを作成した。同様に、C末端にEYFP、細胞内ループ領域2にRlucを挿入したプラスミドを作成した。さらに、C末端にEYFP、細胞内ループ領域3の異なる位置にRlucを挿入した2種類のプラスミドを作成した。
また、Prostaglandin I2 receptorのC末端にEYFP遺伝子をつなげたプラスミド、C末端細胞内領域にEYFP遺伝子を挿入したプラスミドを作成した。この2種のプラスミドの細胞内ループ領域1にRluc遺伝子を挿入した。同様に、C末端またはC末端細胞内領域にEYFP、細胞内ループ領域2にRlucを挿入したプラスミドを作成した。さらに、C末端またはC末端細胞内領域にEYFP、細胞内ループ領域3の異なる位置にRlucを挿入した合計4種類のプラスミドを作成した。
さらに、Thromboxane A2 receptorのC末端にRluc遺伝子をつなぎ、さらに細胞内ループ領域3にEYFP遺伝子を挿入したプラスミドを作成した。また、Prostaglandin I2 receptorのC末端にRluc遺伝子をつなげたプラスミド、C末端細胞内領域にRluc遺伝子を挿入したプラスミドを作成し、この2種のプラスミドの細胞内ループ領域3にEYFP遺伝子を挿入した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
平成28年度は、その他の業務の実施に必要となる時間の変更に伴い、研究のための時間を当初予定よりとることができなかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
当初、平成29年度前半終了をめどにagonistおよびantagonistに応答するThromboxane A2 receptor、Prostaglandin I2 receptor由来のバイオセンサーを完成する計画であったが、予定より少し遅れているので、4種類のバイオセンサーのうち完成したものから、逐次それらを用いた解析を進めていく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
当初予定通りの研究時間を割けず研究の進捗が遅れているため、物品費等の支出が少なかった。
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| 次年度使用額の使用計画 |
研究の遂行をより効率的に行って平成29年度には平成28度の遅れを取り戻す予定なので、平成28年度未使用分は平成29年度中に使用する予定である。
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