| 研究課題/領域番号 |
16K15715
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| 研究機関 | 国立研究開発法人国立がん研究センター |
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研究代表者 |
常木 雅之 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, 研究員 (40714944)
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| 研究分担者 |
荒川 博文 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, 分野長 (70313088)
中村 康之 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, 主任研究員 (90569063)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | 男性不妊 / 酸化ストレス / 精子 / ミトコンドリア / Mieap |
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| 研究実績の概要 |
本研究はMieapノックアウトマウスの解析から明らかとなった、Mieapのミトコンドリア品質管理機構の精子ミトコンドリア・酸化ストレス制御の役割について、そのメカニズムの詳細を明らかとし、ミトコンドリア由来酸化ストレスに起因する男性不妊に対する革新的な治療戦略を確立することにある。
不妊は我が国の社会問題として深刻であるが、精子に起因する男性不妊の治療法はおろか、その病理も未解明のままである。本研究は、がん研究で新規同定されたミトコンドリア品質管理機構を制御する蛋白質Mieapが、予期せず精子運動能を明瞭に制御することを端緒とした萌芽的研究であり、精子無力症の分子病理にはじめて迫る可能性が極めて高く、精子におけるMieapの分子機能を明らかにするとともに、精子運動能改善という男性不妊の根本的な革新的治療戦略基盤を確立することを目的としている。
今年度は研究実施計画に従って、精子におけるMieap相互作用分子の同定を試みた。野生型（WT）及びMieap欠損（KO）マウスの精子溶解液を用いて抗Mieap抗体によって免疫沈降実験を行った。沈降物に対して網羅的プロテオミクス解析を行っている。沈降物に対して網羅的プロテオミクス解析を行い、WT及びKOの2群間においてWTにおいてのみMieapとの結合が確認できた蛋白質を候補として抽出する事で、精子において特異的にMieapが結合する相互作用分子の特定を進めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
野生型（WT）及びMieap欠損（KO）マウスの精子溶解液を用いて抗Mieap抗体によって免疫沈降実験を行った。沈降物に対して網羅的プロテオミクス解析を進めている。
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| 今後の研究の推進方策 |
当初計画では、精子のみを解析対象としていたが、その後のMieap KOマウスの解析から、精巣における精子の分化・成熟過程におけるMieap制御性ミトコンドリア品質管理機構の役割の重要性が示唆されるデータが得られたため、Mieap WT及びKOマウスの精巣全体を用いた蛋白抽出液に対する抗Mieap抗体による免疫沈降実験と沈降物に対する網羅的プロテオミクス解析を行うことを追加する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
解析対象を精子のみから精子及び精巣に拡大し、免疫沈降物に対する網羅的プロテオミクス解析を行うことになったため
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| 次年度使用額の使用計画 |
Mieap WT及びKOマウスの精巣の蛋白抽出液を用いて抗Mieap抗体による免疫沈降実験を行い、網羅的プロテオミクス解析を行う。
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