| 研究課題/領域番号 |
16K18557
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
西村 俊哉 名古屋大学, 理学研究科, 助教 (10758056)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | 性転換 / 生殖細胞 / 卵形成 / メダカ |
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| 研究実績の概要 |
本研究では環境に応答した性転換の仕組みを明らかにするために、生殖細胞の卵への運命が決まる過程をモデルとして解析を行う。まずは正常な卵形成過程で発現している既知の遺伝子（foxl3/figla）が卵形成において積極的に関与するのかを明らかにし、次に未だ同定されていない、foxl3の下流で働き、かつ、figlaの上流で働く遺伝子の探索を行う。さらに環境に応答して発現変動を示す「ゆらぐ因子」を同定するために、ストレスに応答して作られる精巣卵、及び、foxl3変異体の卵巣内での候補因子の発現・機能を調べる。最後に同定した因子とストレス関連シグナルとの相互作用を調べることで、「ゆらぐ因子」の発現制御の仕組みを明らかにする。
foxl3とfigla遺伝子が卵形成に積極的に関与するのか明らかにするために、cre/loxPシステムによるコンディショナルに強制発現が可能なトランスジェニックメダカの作製を行った。その結果、foxl3とfigla遺伝子がオスの精巣内の生殖細胞において、発現可能なトランスジェニックメダカの作製に成功した。また、foxl3の下流で働く遺伝子を同定するために、foxl3変異体と野生型メダカから単離した生殖細胞の遺伝子発現プロファイルを得た。in situ hybridizationによるスクリーニングにより生殖細胞において性的二型を示す候補遺伝子をいくつか同定した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
卵形成に関わる遺伝子 (foxl3/figla) をオスの生殖細胞において強制発現可能なトランスジェニックメダカの作製に成功したため。foxl3の下流で働く候補因子が得られたため。
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| 今後の研究の推進方策 |
現在、２８年度に作製したトランスジェニックメダカとヒートショックによりcreの発現を誘導可能なトランスジェニックメダカを交配している。これらのオスメダカを熱処理することで、精巣内の生殖細胞においてfoxl3/figlaの強制発現を行い、卵形成が見られるのか検証を行う。またfoxl3の下流で働く遺伝子の探索をin situ hybridizationによりさらに進めるとともに、FOXL3抗体を用いたChiP-seqを行い、FOXL3が直接制御する遺伝子群の探索も進める。さらに同定した候補遺伝子が環境応答によって発現変動がみられるのか明らかにするために、ストレスによる精巣卵誘導時、及び、foxl3変異体の卵巣内での発現・機能を調べる。
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