微細藻類ユーグレナが低酸素・嫌気条件下で生産するワックスエステルは、バイオ燃料として利用できる特性を有する。さらに生産量の向上や組成の改変等を達成するには、未解明の点が多いワックスエステル合成の合成経路および代謝メカニズムを解明することが必須である。本研究では、主に低酸素下でのミトコンドリア電子伝達系の寄与に焦点をあて研究を進めてきた。前年度までに低酸素下でミトコンドリア電子伝達系複合体IでNADHの酸化により生じた電子が、低い酸化還元電位を有するロドキノン、電子伝達フラボタンパク質を介して、脂肪酸β酸化系における「不可逆酵素」と考えられてきたアシル-CoAデヒドロゲナーゼ(ACD)に伝達され、trans-エノイル-CoA還元反応に供給されることを示唆するデータを獲得してきた。本年度は、さらに低酸素下で機能するACDアイソザイムの同定および機能推測を行うために、ユーグレナESTデータベースから7種のACDアイソザイムを同定し、これらが低酸素下ワックスエステル合成に及ぼす影響を、ユーグレナ細胞を用いた遺伝子発現抑制系により調べた。各ACDアイソザイムの発現抑制は、細胞の好気的な増殖には全く影響を及ぼさなかった。定常状態まで生育させた細胞を低酸素曝露することで、嫌気的代謝やワックスエステル合成に及ぼす影響を調べたところ、2種のアイソザイムがワックスエステル合成で機能していること、両者の鎖長特異性は異なるが、互いに一部の機能を相補しあっていることを見出した。
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