白血病細胞純化システムを用いた急性骨髄性白血病の新規予後因子探索

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K19193
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 松尾 英将 京都大学, 医学研究科, 助教 (80769737)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 次世代シークエンス / MLL再構成 / 急性骨髄性白血病 / CCND3 / CDK4/6 / 遺伝子変異 / 予後因子

研究実績の概要

JCCG（日本小児がん研究グループ）AML委員会による臨床試験AML-05に登録された小児MLL再構成AML症例の余剰検体を用いて、次世代シークエンサーを用いた網羅的な遺伝子解析（全エクソンシークエンス9例、ターゲットシークエンス56例）を行った。その結果、約9%においてCCND3遺伝子変異を同定し、さらに成人MLL再構成AMLの追加解析でも約3%の症例に変異がみられた。
CCND3遺伝子はタンパク質cyclin D3をコードしており、CDK4/6と複合体を形成することで細胞周期（G1期→S期）を正に制御している。今回同定した全てのCCND3遺伝子変異は、PESTドメインという、タンパク質の分解に関わる領域に局在していたことから、PESTドメインの変異によりcyclin D3が安定化し、MLL再構成AML細胞の増殖を促進していると考えられた。そこで、CCND3をsiRNAを用いてノックダウンしたところ、細胞増殖および細胞周期が有意に抑制された。
次に、CDK4/6が治療ターゲットとなる可能性を考え、乳がんで近年臨床応用されているCDK4/6阻害剤のうち代表的な2種類（Palbociclib、Abemaciclib）を、CCND3遺伝子変異を持つMLL再構成AML細胞株であるML-2に添加したところ、細胞増殖・細胞周期を著明に抑制することが明らかになった。よってCCND3変異陽性のMLL再構成AML治療において、CDK4/6阻害剤が有望であると考えられた。
さらに、MLL-MLLT3再構成AMLのうち共存変異を有する症例(n=16)は、共存変異を持たない症例(n=9)と比較して無再発生存率、全生存率ともに有意に低く(P=0.048、0.046)、共存変異の存在が予後不良因子となることが明らかになった。

研究成果

• [雑誌論文] Introduce My Article (2019)
  • 著者名/発表者名: 松尾英将
  • 雑誌名: 臨床血液 巻: 60:3 ページ: 256
• [雑誌論文] Recurrent CCND3 mutations in MLL-rearranged acute myeloid leukemia (2018)
  • 著者名/発表者名: Hidemasa Matsuo, Kenichi Yoshida, Kazutaka Fukumura, ... , Yasuhiko Kamikubo, Seishi Ogawa, Souichi Adachi
  • 雑誌名: Blood Advances 巻: 2 ページ: 2879～2889
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2018019398
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Recurrent genomic aberrations of D-type cyclins are therapeutic targets of CDK4/6 inhibitors in t(8;21) and MLL-rearranged acute myeloid leukemia (2018)
  • 著者名/発表者名: Hidemasa Matsuo, Kenichi Yoshida, Kazutaka Fukumura, ... , Yasuhiko Kamikubo, Seishi Ogawa, Souichi Adachi
  • 学会等名: 60th ASH Annual Meeting and Exposition
  • 国際学会
• [学会発表] Comprehensive Analysis of 343 Genes Using Targeted Sequencing Panel By Next-Generation Sequencer in 77 Pediatric AML Patients with Normal and Complex Karyotypes: Jccg Study, JPLSG AML-05 (2018)
  • 著者名/発表者名: Taeko Kaburagi, Genki Yamato, Norio Shiba, Kenichi Yoshida, Yusuke Hara, Yuichi Shiraishi, Kentaro Ohki, Manabu Sotomatsu, Hirokazu Arakawa, Hidemasa Matsuo, Akira Shimada, Nobutaka Kiyokawa, Daisuke Tomizawa, Takashi Taga, Keizo Horibe, Satoru Miyano, Seishi Ogawa, Souichi Adachi, Yasuhide Hayashi
  • 学会等名: 60th ASH Annual Meeting and Exposition
  • 国際学会
• [学会発表] Landscape and prognostic significance of coexisting mutations in pediatric MLL-rearranged AML (2018)
  • 著者名/発表者名: Hidemasa Matsuo, Kenichi Yoshida, Yuichi Shiraishi, Kenichi Chiba, Hiroko Tanaka, Hiroo Ueno, Nobutaka Kiyokawa, Daisuke Tomizawa, Takashi Taga, Akio Tawa, Satoru Miyano, Yasuhiko Kamikubo, Seishi Ogawa, Souichi Adachi
  • 学会等名: The 33rd World Congress of Biomedical Laboratory Science (IFBLS)
  • 国際学会
• [学会発表] Identification of recurrent CCND3 mutations in MLL-rearranged acute myeloid leukemia (2018)
  • 著者名/発表者名: Hidemasa Matsuo, Kenichi Yoshida, Kazutaka Fukumura, ... , Yasuhiko Kamikubo, Seishi Ogawa, Souichi Adachi
  • 学会等名: 第80回日本血液学会学術集会
• [学会発表] The detection of minor clones with somatic KIT D816V mutations in pediatric de novo AML (2018)
  • 著者名/発表者名: Koji Sasaki, Norio Shiba, Yuri Uchiyama, Junji Ikeda, Masahiro Yoshitomi, Yuko Shimosato, Mayu Tokumasu, Hidemasa Matsuo, ... , Naomichi Matsumoto, Shuichi Ito, Yasuhide Hayashi
  • 学会等名: 第80回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Analysis of the functional role of CBFB in leukemogenesis (2018)
  • 著者名/発表者名: Mina Noura, Ken Morita, Hidemasa Matsuo, Hiroshi Sugiyama, Yasuhiko Kamikubo, Souichi Adachi
  • 学会等名: 第41回日本分子生物学会年会
• [備考] 京都大学大学院医学研究科人間健康科学系専攻検査応用開発学分野 血液・生体防御学研究室ホームページ
  • URL: https://adachilab-kyotouniv.amebaownd.com/
• [備考] 急性骨髄性白血病の新規遺伝子変異を発見 －乳がんの既存薬が治療に有効である可能性－
  • URL: http://www.kyoto-u.ac.jp/ja/research/research_results/2018/181101_1.html
• [備考] 白血病、既存の乳がん薬が効果 京大が遺伝子変異特定
  • URL: https://www.nikkei.com/article/DGXMZO37173800R31C18A0000000/