猪苓湯が出血性膀胱炎に作用する分子生物学的機構の解明

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 16K19311
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 川島 希 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院助教 (30772264)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 漢方医学 / 猪苓湯 / 小児血液・悪性腫瘍 / 造血細胞移植 / 出血性膀胱炎

研究実績の概要

我々はこれまでに造血細胞移植後BKウイルス出血性膀胱炎に対して漢方エキス製剤である猪苓湯が止血期間と罹患期間の短縮に有効であることを報告したが、今期の研究では小児血液・悪性疾患患者においてBKウイルスだけではなくアデノウイルスが出血性膀胱炎の原因である場合においても猪苓湯の投与が止血期間の短縮に寄与することを示し、またアルキル化剤であるイホスファミド誘発性の非ウイルス性出血性膀胱炎の止血と罹患期間の短縮にも有効であることを示した。このようにその原因を問わず広く出血性膀胱炎に猪苓湯が有効であることを証明した。今期の研究では猪苓湯投与前後で漢方医学的診察を行い、診断時に認められた泌尿器系の炎症を示す漢方医学的所見である臍下硬満・熱感や滑脈は、猪苓湯投与により膀胱炎症状が消失した後では統計学的に有意に改善がみられ、同時に猪苓湯治療前後に得られたコンピュータ断層画像による泌尿器系の画像所見の比較では、膀胱炎を示す所見のうち膀胱周囲結合組織の毛羽立ちは猪苓湯投与により改善するが膀胱壁肥厚は残存する場合が多いことが判明した。
以上より、猪苓湯治療による漢方医学的投与目標の改善は客観的画像所見では膀胱周囲組織の炎症所見の改善として表現できうるということが示され、伝統医学と現代医学を結びつける新知見が得られた。しかし一方でこれは猪苓湯が膀胱上皮細胞だけではなく膀胱および膀胱周囲組織を標的として抗炎症作用を有することを示唆しており、このため出血性膀胱炎に対する猪苓湯の作用機序を解明するには、in vitro膀胱上皮細胞障害モデルでは限界があると考えられる。現在、in vivo出血性膀胱炎動物モデルに対する猪苓湯エキスによる改善モデルを確立すべく研究中である。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

膀胱炎in vitroモデルとしてヒト線維芽細胞株WI-38を猪苓湯エキスおよび対照として五苓散エキスを添加したメディウムで細胞培養を行いwound healing assayを行ったが両者で有意差を認められなかった。このためin vitro膀胱炎モデルで生薬煎じ液を検討することには限界があると考えられる。また研究実績の概要で述べたように膀胱組織および周囲組織に複合的に猪苓湯が効果を有する可能性があることからも、in vivo膀胱炎モデルに対する漢方製剤治療モデル確立が必要である。

今後の研究の推進方策

出血性膀胱炎モデルマウスに対する猪苓湯エキス製剤による治療モデルを確立する。そのモデルに対して、猪苓湯を構成する生薬の煎じ液単独あるいは複数の生薬の組み合わせで、猪苓湯の治療効果が得られるかどうか探索する。猪苓湯の主たる効果をもたらす生薬あるいは複数の生薬が同定できた場合、更にその成分を分析同定する。

次年度使用額が生じた理由

当初平成28年度中に終了する予定であった出血性膀胱炎モデル動物に対する猪苓湯エキスによる改善モデルの確立が遅延しているためである。

次年度使用額の使用計画

次年度も本年度と同様に研究設備は既存の設備を用いるため、ほぼマウスの購入費用と飼育費用および消耗品に次年度使用額を充当する。疾患モデル動物にはC57BL/6を購入するが、治療モデルの確立が困難である場合、別の系統のマウスを購入する。組織切片の作製費用、免疫組織化学染色費用が別途必要である。生薬煎じ液の作成のため、日局カッセキ、日局タクシャ、日局チョレイ、日局ブクリョウと、アキョウの代用品としてエキス剤製造に用いられている日局ゼラチンを購入する。煎じ液の分画抽出のため固相抽出カラムを購入する。その成分の同定のために行うマススペクトロメトリーの費用が別途必要である。

研究成果

• [雑誌論文] Clinical utility of next-generation sequencing-based minimal residual disease in paediatric B-cell acute lymphoblastic leukaemia. (2017)
  • 著者名/発表者名: Sekiya Y, Xu Y, Muramatsu H, Okuno Y, Narita A, Suzuki K, Wang X, Kawashima N, Sakaguchi H, Yoshida N, Hama A, Takahashi Y, Kato K, Kojima S.
  • 雑誌名: British Journal of Haematology 巻: 176 ページ: 248-257
  • DOI: 10.1111/bjh.14420
  • 査読あり
• [雑誌論文] Kampo patterns and radiology in children receiving choreito for hemorrhagic cystitis after hematopoietic stem cell transplantation. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kawashima N, Sekiya Y, Narita A, Kamei M, Muramatsu H, Nishio N, Hama A, Ito Y, Takahashi Y, Kojima S.
  • 雑誌名: Traditional & Kampo Medicine 巻: 3 ページ: 136-144
  • DOI: 10.1002/tkm2.1053
  • 査読あり
• [雑誌論文] Abnormal urinalysis on day 7 in patients with IgA vasculitis (Henoch-Schoenlein purpura). (2016)
  • 著者名/発表者名: Kawashima N, Kawada J, Nishikado Y, Kitase Y, Ito S, Muramatsu H, Sato Y, Kato T, Natsume J, Kojima S.
  • 雑誌名: Nagoya Journal of Medical Science 巻: 78 ページ: 335-347
  • DOI: 10.18999/nagjms.78.4.359
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 【子どもの味方・漢方処方箋】 小柴胡湯(ショウサイコトウ)と柴胡桂枝湯(サイコケイシトウ) くり返す上気道炎 (2016)
  • 著者名/発表者名: 川島希
  • 雑誌名: チャイルドヘルス 巻: 19 ページ: 415-419
• [雑誌論文] JAK2, MPL, and CALR mutations in children with essential thrombocythemia. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sekiya Y, Okuno Y, Muramatsu H, Ismael O, Kawashima N, Narita A, Wang X, Xu Y, Hama A, Fujisaki H, Imamura T, Hasegawa D, Kosaka Y, Sunami S, Ohtsuka Y, Ohga S, Takahashi Y, Kojima S, Shimada A.
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 266-267 ページ: 266-267
  • DOI: 10.1007/s12185-016-2022-2
  • 査読あり
• [雑誌論文] Successful T cell reconstitution after unrelated cord blood transplantation in a patient with complete DiGeorge syndrome. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kojima D, Muramatsu H, Okuno Y, Kataoka S, Murakami N, Tanahashi Y, Suzuki K, Kato T, Sekiya Y, Kawashima N, Narita A, Nishio N, Hama A, Imai K, Nonoyama S, Takahashi Y, Kojima S.
  • 雑誌名: Journal of Allergy and Clinical Immunology 巻: 138 ページ: 1471-1473
  • DOI: 10.1016/j.jaci.2016.04.048
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytokine-Based Diagnostic Program in Pediatric Aplastic Anemia and Hypocellular Refractory Cytopenia of Childhood. (2016)
  • 著者名/発表者名: Elmahdi S, Hama A, Manabe A, Hasegawa D, Muramatsu H, Narita A, Nishio N, Ismael O, Kawashima N, Okuno Y, Xu Y, Wang X, Takahashi Y, Ito M, Kojima S.
  • 雑誌名: Pediatric Blood & Cancer 巻: 63 ページ: 652-658
  • DOI: 10.1002/pbc.25799
  • 査読あり
• [雑誌論文] Correlation of rabbit antithymocyte globulin serum levels and clinical outcomes in children who received hematopoietic stem cell transplantation from an alternative donor. (2016)
  • 著者名/発表者名: Elmahdi S, Muramatsu H, Narita A, Torii Y, Ismael O, Kawashima N, Okuno Y, Sekiya Y, Xu Y, Wang X, Hama A, Ito Y, Takahashi Y, Kojima S.
  • 雑誌名: Pediatric Transplantation 巻: 20 ページ: 105-113
  • DOI: 10.1111/petr.12620
  • 査読あり
• [雑誌論文] MEF2D-BCL9 Fusion Gene Is Associated With High-Risk Acute B-Cell Precursor Lymphoblastic Leukemia in Adolescents. (2016)
  • 著者名/発表者名: Suzuki K, Okuno Y, Kawashima N (co-first author), Muramatsu H, Okuno T, Wang X, Kataoka S, Sekiya Y, Hamada M, Murakami N, Kojima D, Narita K, Narita A, Sakaguchi H, Sakaguchi K, Yoshida N, Nishio N, Hama A, Takahashi Y, Kudo K, Kato K, Kojima S.
  • 雑誌名: Journal of Clinical Oncology 巻: 34 ページ: 3451-3459
  • DOI: 10.1200/JCO.2016.66.5547
  • 査読あり
• [学会発表] 小児血液・悪性疾患の支持療法から考えるこどもの診療 (2017)
  • 著者名/発表者名: 川島希
  • 学会等名: 第54回北九州小児血液・腫瘍懇話会
  • 発表場所: リーガロイヤルホテル小倉（福岡県北九州市）
  • 年月日: 2017-02-10 – 2017-02-10
  • 招待講演
• [学会発表] 猪苓湯は小児血液・腫瘍疾患患者にみられる出血性膀胱炎を止血する (2016)
  • 著者名/発表者名: 川島希, 片岡伸介, 濱田太立, 市川大輔, 小島大英, ,鈴木喬悟, 村上典寛, 谷口理恵子, 関屋由子, 西川英里, 成田敦, 村松秀城, 西尾信博, 濱麻人,小島勢二, 高橋義行
  • 学会等名: 第58回日本小児血液・がん学会学術集会
  • 発表場所: 品川プリンスホテル（東京都品川区）
  • 年月日: 2016-12-15 – 2016-12-17
• [学会発表] 造血細胞移植関連血栓性微小血管障害症に対して漢方診療の併用が奏効したと考えられた急性白血病の一例 (2016)
  • 著者名/発表者名: 川島希
  • 学会等名: 第46回日本東洋医学会東海支部学術総会
  • 発表場所: 名古屋大学医学部附属病院（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2016-11-20 – 2016-11-20
• [学会発表] 夜啼・驚啼に対する甘麦大棗湯の起源：医史学的考察 (2016)
  • 著者名/発表者名: 川島希
  • 学会等名: 第44回日本小児東洋医学会学術集会
  • 発表場所: 千里ライフサイエンスセンター（大阪府豊中市）
  • 年月日: 2016-09-18 – 2016-09-18
• [学会発表] 小児長期入院患者の夜泣き・夜驚症に対する甘麦大棗湯 (2016)
  • 著者名/発表者名: 川島希
  • 学会等名: 第67回日本東洋医学会学術総会
  • 発表場所: サンポートホール高松（香川県高松市）
  • 年月日: 2016-06-03 – 2016-06-05
• [図書] 小児疾患の身近な漢方治療 14 (2016)
  • 著者名/発表者名: 日本小児漢方交流会（企画・編集）
  • 総ページ数: 96(74-91)
  • 出版者: メジカルビュー社