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次世代の肝不全治療としてヒト人工多能性幹（hiPS）細胞を用いた細胞移植が期待されている。また、hiPS細胞を利用した技術は、 細胞の品質の確保や、安定に大量供給する技術が求められている。申請者らは細胞表面分子（CD13及びCD133）の発現を指標に、hiPS 細胞から高増殖性の肝前駆細胞を誘導・純化できることを報告している。本研究では、網羅的スクリーニングにより得た細胞表面分子のプロファイルに基づき、適切な添加因子と足場材料の選定を行い、hiPS由来肝前駆細胞のフィーダー細胞無しでさらにDefineされた成分のみを含む安全な新規培養系の確立を目的とした。hiPS細胞由来肝前駆細胞の網羅的な表面分子の検討より、サイトカインとしてEpidermal Growth Factor（EGF）、Neuregulin1（NRG1）の添加が重要であることを見出している。また、足場材料としてラミニン511のFragment上にて培養することで、hiPS/ES細胞由来肝前駆細胞の高い増殖能を維持でき、フィーダー細胞として使用していた胎児繊維芽細胞を代替可能であることを見出した。これらの条件を検討することで、ヒトiPS細胞由来の長期肝前駆細胞の培養系を確立した。今後、chemically defined serum-free culture conditionの構築の為に、本培養系を用いた血清非添加等の培養条件の検討を進めると共に、レトロウイルス等を用いた遺伝子発現により肝前駆細胞の増殖等に重要な因子の探索を進める予定である。
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