2017 年度実施状況報告書

リン脂質代謝を基盤とした大動脈疾患の機序解明と治療・予防法開発に向けての基盤構築

研究課題

研究課題/領域番号	16K19436
研究機関	山梨大学
研究代表者	渡辺一広山梨大学, 大学院総合研究部, 臨床助教 (50535549)
研究期間 (年度)	2016-04-01 – 2019-03-31
キーワード	分泌性ホスホリパーゼA2 / 大動脈解離 / 細胞外マトリックス
研究実績の概要	本研究は大動脈疾患に関わる細胞外分泌性ホスホリパーゼA2(ｓPLA2)を網羅的に探索し、当該ｓPLA2の病態における作用メカニズムを分子レベルで解明することを目的とする。各種sPLA2アイソザイムの遺伝子欠損マウスにAngiotensin IIを持続皮下投与したところ、sPLA2-V遺伝子欠損マウスでのみ大動脈解離を高率に発症することを確認した。qPCRおよび免疫染色によりsPLA2-Vが大動脈内皮細胞に発現することを確認した。 lysyl oxidase(LOX)は細胞外マトリックスの架橋を促進することで大動脈解離を抑制する作用を有する。sPLA2-V遺伝子欠損マウスでは、Angiotensin II投与後の大動脈組織において、LOXのmRNA、タンパク発現、酵素活性が抑制されていることを見出した。それに伴い、sPLA2-V遺伝子欠損マウスのAngiotensin II投与後の大動脈組織ではCollagenの架橋が抑制されていることを確認した。 sPLA2-Vは血中リポ蛋白のリン脂質に作用してオレイン酸やリノール酸を切り出す作用を有することが知られている。ヒト大動脈平滑筋細胞にオレイン酸やリノール酸を添加することで、TGFβ刺激に伴うLOX発現が促進されることを確認した。今後は、大動脈組織やPlasmaのリピドミクス（脂質の網羅的質量解析）を行うことで、in vivoにおいて実際にsPLA2-Vがオレイン酸やリノール酸を動員していることを示すと共に、これらの責任脂質をマウスに投与することで大動脈解離が抑制されることを確認し、大動脈解離の新規治療に繋がる可能性を検討する予定である。
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 2: おおむね順調に進展している理由 sPLA2-V遺伝子欠損マウスの大動脈組織においてLOXの発現および細胞外マトリックスの架橋が抑制されていることが明らかとなり、大動脈解離病態におけるsPLA2-Vの作用メカニズムの一端を捉えることが出来た。また、sPLA2-V関連脂質のオレイン酸やリノール酸が大動脈平滑筋に及ぼす影響についても明らかにすることが出来た。
今後の研究の推進方策	今後は、大動脈組織やPlasmaのリピドミクス（脂質の網羅的質量解析）を行うことで、in vivoにおいて実際にsPLA2-Vがオレイン酸やリノール酸を動員していることを示すと共に、これらの責任脂質をマウスに投与することで大動脈解離が抑制されることを確認し、大動脈解離の新規治療に繋がる可能性を検討する予定である。