染色体大領域欠失と骨髄異型成を結びつける新規評価システムの構築

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16K19575
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 長町 安希子 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 助教 (20585153)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 骨髄異形成症候群

研究実績の概要

本研究は、CRISPR/Cas9システムで7番染色体の広範囲の領域を欠損させたヒトiPS細胞を樹立し、これを造血細胞へ分化させてin vitroで骨髄異形成症候群を再現する、造血細胞異形成評価システムを確立することを目的としている。最終年度である平成29年度は、平成28年度に引き続き、7番染色体大領域欠失ヒトiPS細胞株（7q-iPS）の樹立と、サイトカイン培養によりiPS細胞を各種造血細胞に分化させる手技の確立を進めた。平成28年度に、健常人の上皮細胞由来のiPS細胞であるSB201細胞に、ヒトのMDS症例で高頻度に欠失が見られる7q21バンド近辺を標的にしたターゲットベクターとCRISPR/Cas9エレメントをエレクトロポレーション法（Neonシステム）で導入する系の立ち上げを進めたが、今年度はその手法を用いて、7q21バンド近辺の数カ所の欠失を標的としたターゲットベクターと対応するCRISPR/RNAを作製し、SB201細胞に導入したのち薬剤セレクションを試みたところ、標的箇所ごとにそれぞれ数種類の7q-iPS細胞のクローンを得ることができた。現在、欠失領域部位間や7q-iPS細胞クローン株間での差異を評価するべく、野生株のiPS細胞を用いてEmbryoid body形成法で造血細胞に分化させる系の安定化を継続して進めるとともに、細胞形態の確認や表面マーカー解析、コロニーアッセイなどの評価法で違いが明らかになるかどうか検討を進めている。

研究成果

• [雑誌論文] A paralogous pair of mammalian host restriction factors form a critical host barrier against poxvirus infection. (2018)
  • 著者名/発表者名: Meng X, Zhang F, Yan B, Si C, Honda H, Nagamachi A, Sun LZ, Xiang Y.
  • 雑誌名: PLoS Pathog. 巻: 14 ページ: e1006884
  • DOI: 10.1371/journal.ppat.1006884
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Acquired expression of CblQ367P in mice induces dysplastic myelopoiesis mimicking chronic myelomonocytic leukemia. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakata Y, Ueda T, Nagamachi A, Yamasaki N, Ikeda KI, Sera Y, Takubo K, Kanai A, Oda H, Sanada M, Ogawa S, Tsuji K, Ebihara Y, Wolff L, Honda ZI, Suda T, Inaba T, Honda H.
  • 雑誌名: Blood 巻: 129 ページ: 2148-2160
  • DOI: 10.1182/blood-2016-06-724658
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] The role of Samd9 and Samd9L in the early endocytotic pathway (2017)
  • 著者名/発表者名: Akiko Nagamachi, Hirotaka Matsui, Akinori Kanai, Hiroaki Honda and Toshiya Inaba
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] The role of Samd9 and Samd9L in the early endocytotic pathway (2017)
  • 著者名/発表者名: Akiko Nagamachi, Hirotaka Matsui, Akinori Kanai, Hiroaki Honda and Toshiya Inaba
  • 学会等名: 第79回日本血液学会学術集会