| 研究実績の概要 |
私はこれまでにToll-like receptor 2(TLR2)の発現上昇，P.gingivalis-LPSへの感受性上昇を介し，肝臓での炎症及び線維化を促進することでP.gingivalis歯性感染が非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)の病態を増悪させることをin vivoおよびin vitroの実験で示した．今年度は，歯周炎を進行させる代表的な歯周病原因菌であるP.gingivalis(Pg)，T denticola(Td)，T forsythia(Tf) の3菌種(red complex(RC))混合歯性感染によるNASH病態増悪について, P.gingivalis歯性感染実験と同様の方法を用いて検討した．野生型(WT)マウスに対し，高脂肪食(HFD)を12週間投与して脂肪肝を誘導後，2群に分け，そのうち１群にはred complexを歯髄より歯性感染させた(RC(+)群)．普通食(CD)にて同様に飼育，処置したマウスも作成し、CD-RC(-)/(+)群，HFD-RC(-)/(+)群の4群を作成した．処置後6週間で肝組織を回収し，組織学的に比較検討した． HFD-RC(+)群は他3群(CD-RC(-)/(+)群，HFD-RC(-)群と比較し，マクロファージの集簇数，線維化面積が増加した．以上の結果より，red complex混合感染は，P.gingivalis歯性感染と同様, NASH病態を増悪することが示された.
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| 今後の研究の推進方策 |
in vivo実験において，red complex混合感染においても同様にNASH病態を増悪することが組織学的検討において示されたことから，引き続き肝臓から抽出したmRNAでの炎症性サイトカインおよびインフラマソームmRNA発現の変化および，タンパクレベルでのサイトカインの産生量を比較する．また, 顎骨の変化, および血清中のLPS濃度や炎症性サイトカイン濃度についても比較検討を行う．本年度と同様の方法を用い， TLR2ノックアウトマウスにおいてHFD群を作成し, red complex歯性感染によるNASH病態増悪におけるTLR2経路の意義を明らかにする．また，WTおよびTLR2ノックアウトマウスを用いて，HFD群を作成し, 2種感染群(Pg+Tf / Pg+Td / Td+Tf (+))，非感染群(Pg+Tf / Pg+Td / Td+Tf (-))の2群に分け，計6群を作成し, 同様の検討を行う.
また, in vitro実験において, 正常肝細胞，および脂肪化肝細胞に抗TLR2中和抗体を投与し，TLR2を阻害した後, Pg，Td，Tf 単一菌種生菌，死菌による刺激を行い，炎症性サイトカインmRNA発現の変化における比較検討を行う．
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