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本研究では、ＯＣＰ／ＣｏｌｌａｇｅｎとＭＳＣを組み合わせた担体（ＯＣＰ／Ｃｏｌ・ＭＳＣ）を臨床応用する目的で、イヌ下顎骨区域切除モデルを用いてＯＣＰ/Ｃｏｌ/ＭＳＣの骨再生の評価を行い、ＯＣＰ／Ｃｏｌ・ＭＳＣによる骨組織再建法の確立を目的としている。Ｈ２８年度では、イヌ下顎骨区域切除部にＯＣＰ／Ｃｏｌｌａｇｅｎ単体を埋入し、その骨再生能を評価した。その結果、6頭中3頭での骨架橋が確認された。Ｈ２９年度ではＯＣＰ／Ｃｏｌｌａｇｅｎと組み合わせるＭＳＣの採取、培養方法の確認を行った。塩酸ケタミン２０ｍｇ／㎏、硫酸アトロピン０．５㎎を筋注した後、生理食塩水にて静脈確保し、ペントバルビタール0.5ml／㎏で静脈麻酔を行った後、イヌ腸骨より骨髄穿刺吸引し、骨髄を約５㏄採取した。その骨髄を遠心し、血球、細胞等の沈殿物を分化誘導培地に混合させ、培養し、１～３日目まで培養液を交換することにより浮遊する血球等を除去し、その後ＭＳＣの継代を行った。３日目よりＦＧＦを培養液に添加し、約１０日間培養した。アリザリンレッド染色にて一部石灰化物が確認され、ＭＳＣが分化されていることを確認できた。ＯＣＰ／Ｃｏｌｌａｇｅｎのディスク（径９㎜、厚さ１．５㎜）には約２０万個の細胞を播種する予定であり、イヌ区域切除部位にはＯＣＰ／Ｃｏｌｌａｇｅｎディスク約２０枚使用する予定である。必要な細胞数は４００万個であるが、培養した細胞数はそれ以上であることを確認できた。
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