| 研究課題/領域番号 |
16K21229
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| 研究機関 | 大阪薬科大学 |
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研究代表者 |
倉田 里穂 大阪薬科大学, 薬学部, 助教 (70711729)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | TRIM / ベーチェット病 / 炎症 / 遺伝子欠損マウス / 遺伝子導入マウス / 自己免疫疾患 |
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| 研究実績の概要 |
べーチェット病は、口腔粘膜や外陰部の潰瘍および皮膚やぶどう膜の炎症を主症状とする全身性の炎症性疾患である。全身性の疾患でありながら特定の臓器に症状が現れる傾向が強く、特殊な病態を示す。ぶどう膜炎による失明や度重なる炎症症状は患者のQuality of life(QOL)を著しく低下させることから、新規治療法は社会的にも要求性が高い。免疫応答としてはインターフェロン(IFN) を中心としたTh1型と考えられていたが、自己免疫疾患に深く関与するTh17がベーチェット病の病態に関与することが明らかになりつつある。ベーチェット病について、これまでに数多くの遺伝子関連解析が行われ、ヒト主要組織適合遺伝子複合体のHLA-B*51、HLA-A*26やインターロイキンのIL-10、IL23R-IL12RB2への感受性が報告されている。加えて、HLA領域のSNP関連解析により、新たにTRIM39Rに感受性を見出した。
TRIM39Rは、tripartite motif-containing 39(TRIM39)およびribonuclease P/mitochondrial RNAprocessing 21 kDa subunit(Rpp21)遺伝子間のインタージェニックスプライシングによって、mRNAから翻訳されるキメラタンパク質で、TRIM39のC末端に位置するSPRYドメインがRpp21の酵素活性ドメインに置き換わった分子構造をもつ。TRIM39、TRIM39RおよびRpp21の過剰発現系を、HEK293T細胞を用いて樹立し、マイクロアレイを用いた遺伝子発現網羅的解析により、TRIM39RのみがI型IFN応答を惹起することを見出している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
平成30年度は研究代表者の研究機関異動にともない研究実施場所を移動したため、研究を中断せざるを得なかった。重ねて、大阪府北部における地震や台風の影響により、研究施設の修復やその他の業務が多忙になり、研究計画が大幅に遅れたため、補助事業期間を延長する必要が生じた。
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| 今後の研究の推進方策 |
・遺伝子導入マウスを作製する。
・遺伝子改変マウスのフェノタイプ解析を順次行う。
・TRIM39Rの各ドメイン(RING、B-box、Coiled-coil、PRYおよびRPR)欠損変異体をレポーター遺伝子恒常発現細胞に発現し、IFNの発現変動を分析する。これと並行して、TRIM39Rの分子ターゲット探索を行う。TRIM39Rと相互作用するRNAを免疫沈降法により分離し、次世代シーケンサーを用いたRNAシークエンスによって同定する予定である。同定したRNAは、TRIM39R分子のRPRドメインの結合分子である可能性が高いため、TR IM39RおよびRPRドメイン欠損型TRIM39R(TRIM39RΔRPR)発現ベクターを用いて、相互作用を確認し、RPRドメインの結合分子を同定する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
平成30年度は研究代表者の研究機関異動にともない研究実施場所を移動したため、研究を中断せざるを得なかった。重ねて、大阪府北部における地震や台風の影響により、研究施設の修復やその他の業務が多忙になり、研究計画が大幅に遅れたため、補助事業期間を延長する必要が生じた。1年延長したが、正しく使用する計画である。
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