• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2017 年度 実績報告書

小胞体-ミトコンドリア間のリン脂質輸送タンパク質VAT-1の構造機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 16K21473
研究機関愛媛大学

研究代表者

渡邊 康紀  愛媛大学, 農学研究科, 助教 (30772636)

研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2018-03-31
キーワードリン脂質輸送タンパク質
研究実績の概要

昨年度に引き続き,高等真核生物の小胞体膜からミトコンドリア外膜へのホスファチジルセリン(PS)輸送能が指摘されているVAT-1についてPS輸送の分子メカニズムを明らかにするため,VAT-1の構造機能解析を行っている.大腸菌の系を用いて調製したヒト由来VAT-1を用いて,リポソーム間のリン脂質輸送活性を質量分析を利用して解析したところ,VAT-1にはPSだけではなくホスファチジン酸およびホスファチジルグリセロールにも輸送能があることが明らかになり,VAT-1は酸性リン脂質特異的に輸送することが示唆された.2.2 オングストローム分解能で決定したVAT-1の結晶構造は,出芽酵母のNADPH:キノン酸化還元酵素Zta1とよく似ていた.Zta1の構造中にはNADPHが結合する溝が存在し,同様の溝はVAT-1にも見いだされたが,溝を構成するアミノ酸残基はZta1とは異なり,実際にNADPHとの結合は見られなかった.VAT-1の溝を構成するアミノ酸残基の変異体を用いたPS輸送アッセイからVAT-1の溝はリン脂質輸送に重要であることが示され,この溝にリン脂質が結合する可能性が示唆された.VAT-1の結晶構造には塩基性残基と疎水性残基から構成されたループ構造が分子表面から突出している.このループ領域の変異体についてリン脂質輸送活性が低下していた.さらに,ループ領域の変異によりリポソームとの結合は見られなくなったことから露出したループ領域はリン脂質輸送活性および膜結合能に重要であることが明らかになった.Trpの蛍光強度変化の測定により,突出したループ中の二つのTrp残基は側鎖が膜に刺さるように相互作用することが示唆された.VAT-1の構造機能解析により,リン脂質輸送における膜との結合様式およびリン脂質の認識メカニズムが示唆された.現在投稿論文として準備中である.

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2017

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Inactivation of cardiolipin synthase triggers changes in mitochondrial morphology2017

    • 著者名/発表者名
      Matsumura Ayaka、Higuchi Jun、Watanabe Yasunori、Kato Masahiro、Aoki Keigo、Akabane Shiori、Endo Toshiya、Oka Toshihiko
    • 雑誌名

      FEBS Letters

      巻: 592 ページ: 209~218

    • DOI

      10.1002/1873-3468.12948

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] VAT-1によるER-ミトコンドリア間のリン脂質輸送の構造基盤2017

    • 著者名/発表者名
      渡邊康紀,田村康,遠藤斗志也
    • 学会等名
      第17回日本蛋白質科学会年会
  • [学会発表] VAT-1による小胞体-ミトコンドリア間リン脂質輸送の構造的および機構的洞察2017

    • 著者名/発表者名
      渡邊康紀,田村康,遠藤斗志也
    • 学会等名
      2017年度生命科学系学会合同年次大会

URL: 

公開日: 2018-12-17  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi