| 研究実績の概要 |
Ring1A/Bのターゲット遺伝子Glis2による白血病幹細胞制御のメカニズムを明らかにするために、Ring1A/B, Glis2トリプルKOマウス由来の造血幹／前駆細胞にMOZ-TIF2を導入することで作成した白血病細胞を用いて、コロニーアッセイ等のin vitro実験やマウスへの移植実験を行った。Ring1A/B, Glis2トリプルKO白血病細胞の比較対象としてRing1A/BダブルKOマウスから同じ方法で作成した白血病細胞を用いた。
Ring1A/Bの欠損ではGlis2が脱抑制され白血病細胞の分化と細胞死の誘導によりコロニー形成能が完全に消失したが、Glis2を同時に欠損させることで分化が抑制されコロニー形成が部分的に回復した。しかし、Ring1A/B欠損により誘導されるアポトーシスはGlis2を同時に欠損させても阻止できなかった。これらの結果から、特に分化抑制においてGlis2の発現抑制が重要であることが示された。
発症マウスを用いた白血病幹細胞の解析では、Ring1A/Bの欠損により白血病細胞の分化が誘導され、白血病幹細胞が濃縮されているL-GMP分画が劇的に減少したが、Glis2の同時欠損ではL-GMP分画の減少が阻止された。したがって、Ring1A/BはGlis2の発現抑制を介して白血病幹細胞の分化を抑制していることが示された。しかしながら、トリプルKO後の白血病細胞はRing1A/BダブルKO後と同様にマウスにおける発症能を失っていたことから、Ring1A/Bによる幹細胞維持はGlis2の抑制のみに依存しているわけではなく、別のターゲットも存在する可能性が示唆された。
また、Glis2による分化誘導に関与する下流因子を明らかにするためにマイクロアレイ解析を行い、Glis2により発現制御され分化誘導に寄与する遺伝子としてspiBを同定した。
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