エピジェネティクスの制御をめざした新しいレトロウイルスベクターの開発

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 17016015
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 伊庭 英夫 東京大学, 医科学研究所, 教授 (60111449)
• 研究分担者: 原口 健 東京大学, 医科学研究所, 助教 (10549455) ; 水谷 壮利 東京大学, 医科学研究所, 助教 (00376617) ; 箕口 滋 東京大学, 医科学研究所, 助教 (60322757) ; 山道 信毅 東京大学, 医学部附属病院, 非常勤医員 (30463897) ; 伊藤 太二 東京大学, 医科学研究所, 助手 (60343109)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2009
• キーワード: レトロウイルスベクター / RelB / requiem / 足場非依存的な増殖

研究概要

本研究ではshRNA、miRNA及び特定のmiRNAを阻害する新規デコイRNA(TuDRNA)をそれぞれ効率良く発現するユニットをデザインし、これを搭蔵したベクターを作製、改良しながら、ヒトの主要なクロマチン構造変換因子であるSWI/SNF複合体に注目して癌のエピジェネティクスに関する解析を行なった。その結果SWI/SNF複合体の触媒サブユニットの1つであるBrmの発現を欠失したヒト癌細胞株では、外からMLVやHIVを基盤としたベクターを導入してもウイルス遺伝子の発現は長時間持続せず、stochasticなgene silencingがおきることが判明し、Brm型SWI/SNF複合体がレトロウイルスの安定発現を維持するのに必須であることが示された。またBrmの発現欠失は、これらの細胞株の癌の悪性度を増加させていてBrmの癌抑制遺伝子としての機能が明確となった。これらの細胞株のゲノム中には、正常なBrm遺伝子は存在し、しかも活発に転写を受けていて、post-transcriptionalな抑制による制御であることがわかった。この抑制機構として、Brm mRNAを標的とするmiRNAが関与するという作業仮説を立てて実験を行ない、実際にmiR-199aが、Brmを標的としていることを証明した。さらに多くのがん細胞株において、Brmの発現欠失細胞株では例外なしにmiR-199aの発現が高く、反対にBrmの発現がある細胞株はすべてmiR-199aの発現が低かった。我々はさらにmiR-199aとその標的であるBrmが転写制御因子Egr1を介してdouble-negative feedback制御を形成していることを実証した。また同様のdouble-negative feedback制御が、各種の細胞株でmiR-21とその標的のNFIBでも成立することを実証した。
また、ヒトRequiemタンパク質がNFκBファミリー内のRelB/p52とSWI/SNFクロマチン構造変換因子の特異的なリンカーとして機能することを明らかにした。そしてREQ遺伝子に対するshort hairpin RNAを高発現するレトロウイルスベクターをRelBの恒常的亢進が見られる細胞株へと導入してREQタンパク質の発現量を抑制すると、平板培養における増殖速度に影響を与えることなしに非足場依存性増殖を効率良く抑制することから、REQが有力な癌の治療標的となることが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Loss of the Brm-type SWI/SNF chromatin remodeling complex is a strong barrier to the Tat-independent transcriptional elongation of HIV-1 transcripts. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mizutani T, Ishizaka A, Tomizawa M, Okazaki T, Yamamichi N, Kawana-Tachikawa A, Iwamoto A, Iba H.
  • 雑誌名: J of Virol. 83 ページ: 11569-11580
  • 査読あり
• [雑誌論文] LNA in situ hybridization analysis of miR-21 expression during colorectal cancer development. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamamichi N, Shimomura R, Inada K, Sakurai K, Haraguchi T, Ozaki Y, Fujita S, Mizutani T, Furukawa C, Fujishiro M, Ichinose M, Shiogama K, Tsutsumi Y, Omata M, Iba H.
  • 雑誌名: Clin. Cancer Res. 15 ページ: 4009-4016
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cdx2 and the Brm-type SWI/SNF complex cooperatively regulate villin expression in gastrointestinal cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamamichi N, Inada K, Furukawa C, Sakurai K, Tando T, Ishizaka A, Haraguchi T, Mizutani T, Fujishiro M, Shimomura R, Oka M, Ichinose M, Tsutsumi Y, Omata M, Iba H.
  • 雑誌名: Exp. Cell Res. 315 ページ: 1779-1789
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vectors expressing efficient RNA decoys achieve the long-term suppression of specific microRNA activity in mammalian cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi T, Ozaki Y, Iba H.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. 37 ページ: e43
• [雑誌論文] Mir-21 gene expression triggered by AP-1 is sustained through a double negative feedback mechanism. (2008)
  • 著者名/発表者名: Fujita S, Ito T, Mizutani T, Minoguchi S, Yamamichi N, Sakurai K, Iba, H.
  • 雑誌名: J. Mol. Biol 378 ページ: 492-504
• [雑誌論文] Instability of retroviral DNA methylation in embryonic stem cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Minoguchi S, Iba, H.
  • 雑誌名: Stem Cells 26 ページ: 1166-1173
• [雑誌論文] Class-specific regulation of pro-inflammatory genes by MYD88 pathways and IκBζ. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kayama H, Ramirez-Carrozzi VR, Yamamoto M, Mizutani T, Kuwata H, Iba H., Matsumoto M, Honda, K, Smale ST, Takeda, K.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 283 ページ: 12468-12477
• [雑誌論文] Brm transactivates the telomerase reverse transcriptase (TERT) gene and modulates the splicing patterns of its transcripts in concert with p54nrb (2008)
  • 著者名/発表者名: Ito T, Watanabe H, Yamamichi N, Kondo S, Tando T, Haraguchi T, Mizutani T, Sakurai K, Fujita S, Izumi T, Isobe T, Iba H.
  • 雑誌名: Biochemical J. 411 ページ: 201-209
• [雑誌論文] Putative promoter regions of miRNA genes involved in evolutionarily conserved regulatory systems among vertebrates. (2008)
  • 著者名/発表者名: Fujita S, Iba H.
  • 雑誌名: Bioinformatics 24 ページ: 303-308
• [雑誌論文] SiRNAs do not induce RNA-dependent transcriptional silencing of retrovirus in human cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi T, Mizutani T, Yamamichi N, Ito T, Minoguchi S, Iba, H.
  • 雑誌名: FEBS Letter 581 ページ: 4949-4954
• [雑誌論文] Frequent loss of Brm expression in gastric cancer correlates with histological features and differentiation state. (2007)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi T, Fujita S, Tsutsumi, Y, Omata M, Iba, H.
  • 雑誌名: Cancer Research 67 ページ: 10727-10735
• [雑誌論文] Behavior of transplanted bone marrow derived mesenchymal stem cells in periodontal defects. (2006)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa N, Kawaguchi H, Hirachi A, Takeda K, Mizuno N, Nishimura M, Koike C, Tsuji K, Iba, H, Kato Y, Kurihara, H.
  • 雑誌名: J. Periodontol. 77 ページ: 1003-7
• [雑誌論文] A protein associated with Toll-like Receptor 4 (PRAT4A) regulates cell surface expression of TLR4. (2006)
  • 著者名/発表者名: Wakabayashi Y, Kobayashi M, Akashi-Takamura S, Tanimura N, Konno K, Takahashi K, Ishii T, Mizutani T, Iba, H, Kouro T, Takaki S, Takatsu K., Oda, Y., Ishihama, Y., Saitoh, S -I., Miyake, K.
  • 雑誌名: J. Immunol 177 ページ: 1772-1779
• [雑誌論文] SWI/SNF complex is essential for NRSF-mediated suppression of neuronal genes in human nonsmall cell lung carcinoma cell lines. (2006)
  • 著者名/発表者名: Watanabe H, Mizutani T, Haraguchi T, Yamamichi N, Minoguchi S, Yamamichi-Nishina M, Mori N, Kameda T, Sugiyama T, Iba H.
  • 雑誌名: Oncogene 25 ページ: 470-479
• [雑誌論文] The Brm gene suppressed at the post-transcriptional level in various human cell lines is inducible by transient HDAC inhibitor treatment, which exhibits anti-oncogenic potential. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yamamichi N, Yamamichi-Nishina M, Mizutani T, Watanabe H, Minoguchi S, Kobayashi N, Kimura S, Ito T, Yahagi N, Ichinose M, Omata M, Iba, H.
  • 雑誌名: Oncogene 24 ページ: 5471-5481
• [雑誌論文] Requiem protein links RelB/p52 and the Brm-type SWI/SNF complex in a non-canonical NFκB pathway.
  • 著者名/発表者名: Tando T, Ishizaka A, Watanabe H, Ito T, Iida S, Haraguchi T, Mizutani T, Izumi T, Isobe T, Akiyama T, Inoue J, Iba H.
  • 雑誌名: J Biol. Chem. (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文]
  • 著者名/発表者名: Yamamichi N, Inada K, Ichinose M, Yamamichi-Nishina M, Mizutani T, Watanabe, H., Shiogama K, Okazaki T, Fujishiro M, Yahagi N
• [学会発表] 特定のmicroRNAを長期間、高効率で阻害するDecoy RNA発現ベクター (2009)
  • 著者名/発表者名: 原口健、伊庭英夫
  • 学会等名: 第68回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20091001-20091003
• [学会発表] Requiem functions in anon-canonical NFκB pathway as a linker protein between Rel/p52 and the SWI/SNF complex (2009)
  • 著者名/発表者名: 丹藤利夫、石坂彩、原口健、水谷壮利、秋山泰身、井上純一郎、伊庭英夫
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-09
• [学会発表] 特定のmicroRNAを高効率で阻害するDecoy RNAの設計(Design of efficient RNA decoys that inhibit specific microRNA activity in mammalian cells. ) (2009)
  • 著者名/発表者名: 原口健、伊庭英夫
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-09
• [学会発表] Synthesis of 5'-capped sirna for suppression of off-target effects and its capability to achieveprotein expression (2009)
  • 著者名/発表者名: Ogata, A., Ueno, Y., Furukawa, C., Sakurai, K., Iba, H., Kitamura, Y., Kitade, Y.
  • 学会等名: Joint Symposium of 5th Annual Meeting of Oligonucleotide TherapeuticsSociety and the 19th Antisense Symposium
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-11-03
• [学会発表] レトロウイルスと宿主細胞間の相互作用のエピジェネティクス-ニワトリレトロウイルス研究の魅力とその展開 (2009)
  • 著者名/発表者名: 伊庭英夫
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-10-26
• [学会発表] HIV-1 Tat非依存的な発現におけるSWI/SNF複合体の作用点の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 水谷壮利
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-10-26
• [学会発表] EBウイルス感染を制御する宿主転写因子の同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 浅井理沙、丹藤利夫、伊庭英夫、神田輝、高田賢蔵、上間匡、川口寧
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-10-26
• [学会発表] クロマチン構造変換因子SWI/SNF複合体の胃癌における発現異常 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山道信毅、稲田健一、一瀬雅夫、藤城光弘、小俣政男、伊庭英夫
  • 学会等名: 触媒サブユニットBrmの発現欠失、組織型・分化マーカーとの関係消化器病学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-10-14
• [学会発表] Gene regulatory networks formed between miR-21 and its targets during the course of carcinogenesis (2009)
  • 著者名/発表者名: Iba, H.
  • 学会等名: 第8回日中がんワークショップ
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-10-05
• [学会発表] The Brm-type SWI/SNF chromatin remodeling complex plays an important role in transcriptional elongation of HIV-1 in the absence of Tat (2009)
  • 著者名/発表者名: Ishizaka, A., Mizutani, T., Tomizawa, M., Kawana-Tachikawa, A., Iwamoto, A., Iba, H.
  • 学会等名: The 9thAwaji International Forum on Infection and Immunity
  • 発表場所: 淡路島
  • 年月日: 2009-09-08
• [学会発表] microRNAの異常発現と発がん (2009)
  • 著者名/発表者名: 伊庭英夫
  • 学会等名: 第41回ケムバイオシンポジウム次世代医療:microRNAとcancer stem cells
  • 発表場所: 東京工業大学大岡山キャンパス
  • 年月日: 2009-03-05
• [学会発表] miR-21と標的遺伝子の発現制御ネットワーク解析(Analysis of regulatory network involving human miR-21 gene and its target genes. ) (2008)
  • 著者名/発表者名: 藤田修二、山道信毅、原口健、尾崎由佳、伊庭英夫
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会第81回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20081209-20081212
• [学会発表] ヒトvillin遺伝子の転写制御機構の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 古川千尋、山道信毅、丹藤利夫、石坂彩、櫻井浩平、原口健、稲田健一、下村龍一、伊庭英夫
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会第81回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20081209-20081212
• [学会発表] miRNAが形成する制御ネットワークとがん (2008)
  • 著者名/発表者名: 伊庭英夫、藤田修二、山道信毅、櫻井浩平、水谷壮利
  • 学会等名: 第67回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20081028-20081030
• [学会発表] HIV-1のTat非依存的な発現を維持するSWI/SNF複合体の作用機序の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 石坂彩、水谷壮利、山道信毅、原口健、富沢麻利子、岩本愛吉、伊庭英夫
  • 学会等名: 第5回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 20081026-20081028
• [学会発表] A Catalytic Subunit of the SWI/SNF Complex is Required for Tat-independent Stable Expression of HIV-1 1st China-Japan (2008)
  • 著者名/発表者名: A Catalytic Subunit of the SWI/SNF Complex is Required for Tat-independent Stable Expression of HIV-1 1st China-Japan
  • 学会等名: Joint Workshop on New-Generation Vaccines for Infectious Diseases
  • 発表場所: 北京
  • 年月日: 2008-05-22
• [学会発表] レトロウイルス遺伝子発現の不安定性の解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 岡崎拓矢、山道信毅、水谷壮利、石坂彩、古川千尋、伊庭英夫
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会第80回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20071211-20071215
• [学会発表] HIV-1のTat非依存的な発現におけるSWI/SNF複合体の機能解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 水谷壮利、石坂彩、山道信毅、原口健、伊庭英夫
  • 学会等名: 第55回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20071021-20071023
• [学会発表] Brm, a catalytic subunit of the SWI/SNF complex is required for Tat-independent stable expression of HIV-1 (2007)
  • 著者名/発表者名: Mizutani T, Ishizaka A, Yamamichi N, Okazaki T, Iba H.
  • 学会等名: 第7回淡路島感染・免疫フォーラム
  • 発表場所: 兵庫
  • 年月日: 20070901-20070905
• [学会発表] AP-1 triggered transcription of miR-21 through an evolutionally conserved mechanism Systems Biology (2007)
  • 著者名/発表者名: Fujita S, Ito T, Mizutani T, Minoguchi S, Yamamichi N, Iba H.
  • 学会等名: Global Regulation of Gene Expression
  • 発表場所: New York, USA
  • 年月日: 20070300-20070400
• [学会発表] The Novel Role of Dnmt3L in Maintenance of DNA Methylation-Dependent Retroviral Gene Silencing (2007)
  • 著者名/発表者名: 箕口滋、伊庭英夫
  • 学会等名: 理化学研究所発生再生科学総合研究センターCDB Symposium 2007
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20070300
• [学会発表] 幹細胞におけるDNAメチル化の動態制御機構 (2007)
  • 著者名/発表者名: 箕口滋
  • 学会等名: 熊本大学発生医学研究センター21世紀COEリエゾンラボ研究会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20070200
• [学会発表] AP-1 triggers the sustained transcription of miR-21 through an evolutionarily conserved feedback mechanism (2007)
  • 著者名/発表者名: Fujita S, Ito T, Mizutani T, Minoguchi S, Yamamichi N, Sakurai K, Iba H.
  • 学会等名: The 11th German-Japanese Cancer Workshop
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2007-11-30
• [学会発表] Frequent Loss of Brm Expression in Gastric Cancer Correlates with Histological Features and Differentiation State (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamamichi N, Inada K, Iba H.
  • 学会等名: 第14回The East Asian Joint Symposium (EAJS14): Expanding Scientific Extending Therapeutic Horizons
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2007-11-13
• [学会発表] High expression of miR-21 was detected in colorectal carcinoma but not in adenoma by LNA-based in situhybridization (2007)
  • 著者名/発表者名: 山道信毅、下村龍一、水谷壮利、稲田健一、藤田修二、櫻井浩平、一瀬雅夫、堤寛、小俣政男、伊庭英夫
  • 学会等名: 第66回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-10-05
• [学会発表] SWI/SNF複合体の触媒サブユニットBrmはTERT遺伝子の転写と選択的スプライシングに関与する (2006)
  • 著者名/発表者名: 伊藤太二、渡部博貴、山道信毅、近藤俊輔、板垣千春、丹藤利夫、水谷壮利、原口健、櫻井浩平、藤田修二、泉友則、礒辺俊明、伊庭英夫
  • 学会等名: 日本分子生物学会2006フォーラム(分子生物学の未来)
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20061206-20061208
• [学会発表] SWI/SNF chromatin remodeling complex and cancer (2006)
  • 著者名/発表者名: Iba, H.
  • 学会等名: The 10th Korea-Japan Cancer Research Workshop
  • 発表場所: Tokyo, Japan
  • 年月日: 20061200
• [学会発表] クロマチン構造変換因子SWI/SNF複合体のHIV-1発現維持機構の機能解析 (2006)
  • 著者名/発表者名: 水谷壮利、石坂彩、山道信毅、岡崎拓矢、伊庭英夫
  • 学会等名: 日本分子生物学会2006フォーラム
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20061200
• [学会発表] レトロウイルスプロモーターサイレンシングにおけるRNAi機構の役割の検証 (2006)
  • 著者名/発表者名: 原口健、水谷壮利、伊庭英夫
  • 学会等名: 第54回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20061119-20061121
• [学会発表] 多くのヒト癌で高レベルに発現するmir-21遺伝子のプロモーター解析とmir-21の標的遺伝子の同定 (2006)
  • 著者名/発表者名: 伊庭英夫、藤田修二、伊藤太二、水谷壮利
  • 学会等名: 第65回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20060928-20060930
• [学会発表] 胃癌におけるクロマチン構造変換因子SWI/SNF複合体の触媒サブユニットBrm欠失:癌化におけるBrm欠失の役割 (2006)
  • 著者名/発表者名: 山道信毅、稲田健一、渡部博貴、山道(仁科)光恵、水谷壮利、矢作直久、一瀬雅夫、堤寛、小俣政男、伊庭英夫
  • 学会等名: 第65回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20060928-20060930
• [学会発表] Structure of human miR-21 promoter that is driven by AP-1 Computational prediction of promoter regions of vertebrate miRNAs (2006)
  • 著者名/発表者名: Fujita S, Ito T, Yamamichi-Nishina M, Iba H.
  • 学会等名: 20th IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology and 11th FAOBMB Congress
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 20060600
• [学会発表] ES細胞に感染したレトロウイルスに見られるDNAメチル化に依存した可逆的ジーンサイレンシング (2005)
  • 著者名/発表者名: 箕口滋、渡部博貴、水谷壮利、伊庭英夫
  • 学会等名: 第28回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20051207-20051210
• [学会発表] p54nrbとSWI/SNF複合体の相互作用とその生化学的意義 (2005)
  • 著者名/発表者名: 伊藤太二、渡部博貴、山道信毅、近藤俊輔、板垣千春、丹藤利夫、水谷壮利、原口健、藤田修二、泉友則、礒辺俊明、伊庭英夫
  • 学会等名: 第28回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20051207-20051210
• [学会発表] Reversible switching of MSCV Proviral Expression Reflects Dynamics of DNA Methylation in Embryonic Stem Cells (2005)
  • 著者名/発表者名: 箕口滋、渡部博貴、水谷壮利、伊庭英夫
  • 学会等名: 文部科学省特定領域研究「幹細胞の可塑性と未分化性維持機構」国際シンポジウム
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20051100
• [学会発表] ヒト癌細胞株で転写後抑制を受けているSWI/SNF複合体の触媒サブユニットBrmは、HDAC阻害剤により発現誘導され抗癌活性を示す (2005)
  • 著者名/発表者名: 山道信毅、水谷壮利、渡部博貴、伊藤太二、矢作直久、一瀬雅夫、小俣政男、伊庭英夫
  • 学会等名: 第64回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20050914-20050916
• [学会発表] BrmとBRG1の発現を共に欠失するヒト非小細胞肺がん細胞株における神経特異的遺伝子群の発現誘導とその機構 (2005)
  • 著者名/発表者名: 渡部博貴、水谷壮利、山道信毅、伊庭英夫
  • 学会等名: 第64回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20050914-20050916
• [学会発表] Unique expression mechanisms of Brm protein, a key regulatory host factor for continuous retroviral expression (2005)
  • 著者名/発表者名: Yamamichi N, Mizutani T, Yamamichi-Nishina M, Haraguchi T, Kameda T, Iba H.
  • 学会等名: 第5回あわじしま感染症・免疫フォーラム
  • 発表場所: 兵庫
  • 年月日: 20050900
• [学会発表] レトロウイルスの発現維持に必須な宿主因子Brmの特異な生合成過程 (2005)
  • 著者名/発表者名: 伊庭英夫、山道信毅、水谷壮利、原口健
  • 学会等名: 第53回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2005-11-22
• [備考]
  • URL: http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/div-host-parasite/Version1.html