自己免疫性甲状腺疾患を中心とした自己免疾患関連遺伝子の解明

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17019069
• 研究機関: 国立病院医療センター(臨床研究部)
• 研究代表者: 笹月 健彦 国立国際医療センター(研究所), 特任研究員 (50014121)
• 研究分担者: 岡村 匡史 国立国際医療センター(研究所), 感染症制御研究部, 室長 (00333790) ; 反町 典子 国立国際医療センター(研究所), 消火器疾患研究部, 室長 (30217468) ; 鈴木 春巳 国立国際医療センター(研究所), 臨床病理研究部, 部長 (70235985) ; 高木 智 国立国際医療センター(研究所), 地域保健医療研究部, 部長 (10242116) ; 白澤 専二 福岡大学, 医学部, 教授 (10253535)
• キーワード: 自己免疫性甲状腺疾患(AITD) / 相関解析 / 疾患感受性遺伝子 / ZFAT / 遺伝子改変マウス / 転写制御因子 / リンパ球

研究概要

自己免疫性甲状腺疾患(AITD)の感受性遺伝子として同定したZFATは、18個のZn-fingerモチーフを有する転写制御因子様タンパクをコードする。そのスプライシングバリアントであるTR-ZFAT (truncated form of ZFAT)は11個のZn-fingerモチーフを持つ。ZFAT特異的抗体を作製し、脾臓及び胸腺において180kDaのZFAT蛋白質の発現を確認した。B細胞、T細胞で発現し、非リンパ球では発現しないことがわかった。リンパ球前駆細胞株を用い、強制発現やノックダウンによる遺伝子発現変化を検討した結果、サイトカインや抗原受容体構成分子など免疫応答に重要な鍵を握る一群の遺伝子発現がZFATにより抑制されることを明らかにした。ZFATおよびTR-ZFATを過剰発現するトランスジェニックマウスを樹立したが、免疫系細胞の分化および活性化に大きな変化はみられなかった。ES細胞での相同組換えを行いキメラマウスの作成を経てZFAT遺伝子欠損ヘテロマウスを得た。これらの交配によりホモ欠損マウス作出を試みた結果、ZFAT欠損個体は胎生致死であり、初期個体発生において必須の役割を果たすことがわかった。トランスジェニックマウスと交配したところ、full-length ZFATではホモ欠損による胎生致死を回避できたがTR-ZFATでは回避されなかった。ZFAT発現量の低下による免疫応答への影響がみられるかどうか検討するため、スピードコンジェニック法によりC57BL6系統への戻し交配を進めた。戻し交配後のZFA+/-ヘテロ個体においてもB細胞およびT細胞の分化に大きな異常はみられなかったが、軽度の脾腫など二次リンパ組織に於ける細胞数増多傾向が観察されている。+/-細胞でさらにノックダウンによりZFAT発現量低下を誘導するべく、shRNA発現ウィルスベクターを作成した。

研究成果

• [雑誌論文] ZFAT is an antiapoptotic molecule and critical for cell survival in MOLT-4 (2009)
  • 著者名/発表者名: Fujimoto T, et al.
  • 雑誌名: FEBS Lett. 583 ページ: 568-572
  • 査読あり
• [雑誌論文] HLA mismatch combinations associated with decreased risk of relapse : Implications for molecular mechamsm. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kawase T, et al.
  • 雑誌名: Blood 113 ページ: 2851-2858
  • 査読あり
• [雑誌論文] Onecut transcription factor OC2 is a direct target of T-bet in type-l T-helper cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Furuno K, et al.
  • 雑誌名: Genes Immun. 9 ページ: 302-308
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential requirement for DOCK2 in migration of plasmacytoid dendritic cells versus myeloid dendritic cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Gotoh K, et al.
  • 雑誌名: Blood 111 ページ: 2973-2976
  • 査読あり
• [雑誌論文] Donor killer immunoglobulin-like receptor (KIR) genotype-patient cognate KIR ligand combination and antithymocyte globulin preadministration are critical factors in outcome of HLA-C-KIR ligand-mismatched T cell-replete unrelated bone marrow transplantation. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yabe T, et al.
  • 雑誌名: Biol Blood Marrow Transplant 14 ページ: 75-87
  • 査読あり
• [雑誌論文] ZFAT expression in B and T lymphocytes and identification of ZFAT-regulated genes. (2008)
  • 著者名/発表者名: Koyanagi M, et al.
  • 雑誌名: Genomics 91(5) ページ: 451-457
  • 査読あり
• [学会発表] Genome-wide survey of ZFAT-regulated genes in antigen-primed CD4+ T cell (2008)
  • 著者名/発表者名: Takashima, et al.
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-11
• [学会発表] BおよびT細胞におけるZFATの発現とその制御因子の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 角田俊之, 他
  • 学会等名: 日本人類遺伝学会第52回大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-09-28
• [産業財産権] ZFAT遺伝子発現抑制RNA (2008)
  • 発明者名: 白澤専二, 他
  • 権利者名: 学校法人福岡大学
  • 産業財産権番号: PCT/JP2008/66155
  • 出願年月日: 2008-09-08