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1. mGluRl conditional knockout(cKO)マウスの解析
mGluRl cKOマウスに、生後24日(P24)からドキシサイクリン(Dox)投与によりmGluRlの発現を停止させるとP61-P65で運動協調能が顕著に悪化するが、P65からDox投与を中止すると、P96-P100でmGluRlの発現が回復すると同時に運動協調能も回復し、神経回路形成後のmGluRl欠損による運動協調能の低下が回復可能であることが明らかとなった。
2. 小脳プルキンエ細胞におけるERK/MAPキナーゼ経路の機能解析
mGluRlの下流に存在するERK/MAPキナーゼ経路の機能を検討するため、ERKの活性化因子であるMEKの優性不能型(dnMEK1)遺伝子をプルキンエ細胞特異的に発現するマウス(L7-tTA Tg/TRE-dnMEKl Tg; HA-dnMEK1 Tg)を作製・解析した。組織学的解析から、HA-dnMEK1 Tgでは平行線維終末の分布には明らかな異常は認められなかったが、登上線維終末の大きさや分布に異常が見られた。また、電気生理学的解析から登上線維によるプルキンエ細胞の多重支配が認められた。これらの結果からERK経路はプルキンエ細胞内で、登上線維終末の形成や維持に関与していることが明らかとなった。
3. mGluRl結合タンパク質の機能解析
mGluRlにHomer結合を阻害するように点変異(P1147E)を導入したmGluRl cDNAをL7プロモーター下に発現させるトランスシーンをmGluRl KOマウス受精卵にインジェクションし、mGluRl(P1147E)によるレスキューマウスを得た。
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