神経変性シグナルの遺伝学的解析による疾患治療ターゲットの解明

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17025010
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 三浦 正幸 東京大学, 大学院・薬学部研究科, 教授 (50202338)
• キーワード: プロテアソーム / ポリグルタミン病 / 神経変性 / 変性蛋白質 / ショウジョウバエ

研究概要

ポリグルタミン病の発症機構を解明する目的で、これまでにショウジョウバエをモデルとした遺伝学的スクリーニングが複数の研究室によって行われてきた。遺伝学的スクリーニングとしては変異原を用いた順遺伝学が一般的であるが、ホモで致死になる遺伝子も多く、神経変性疾患モデルではあまり行われていないのが現状である。今回我々は、複眼特異的に伸長ポリグルタミン質を発現させたショウジョウバエを用いて、順遺伝学的スクリーニングを行った。本スクリーニングでは、変異原としてエチルメタンスルホン酸EMSを用いて点突然変異を誘発させ、得られた点変異を複眼特異的にホモ接合体とする遺伝学的テクニックを用いて行った。この方法の利点の一つは、点変異を複眼特異的にホモ接合体とすることによって、劣性致死でかつホモでポリグルタミン病の表現型を抑制する点変異を得ることができる点である。伸長ポリグルタミン発現によるrough eye表現型を抑制する系統が1つ得られたが、この系統は劣性致死であったため、その系統について染色体欠失領域を持つ系統とのトランスヘテロを用いて、致死性を判定基準とした相補性試験(complementation test)を行った。その結果、致死性を相補しない染色体領域を同定することに成功した。すなわち、この染色体欠失領域に劣性致死変異が存在すると考えられた。現在この領域内に存在する遺伝子のRNAi系統を入手し、伸長ポリグルタミン発現によって生じるrough eyeを回復させることができるのかを検討中である。本スクリーニングによって、生存に必須でかつポリグルタミン病の発症や進行に関わる内在性の因子が同定され、ポリグルタミン病を含めた晩発性神経変性疾患の発症、進行の新たなメカニズムが解明されると期待される。

研究成果

• [雑誌論文] Intrinsic tumor suppression and epithelial maintenance by endocytic activation of Eiger/TNF signaling in Drosophila (2009)
  • 著者名/発表者名: Igaki T, Pastor-Pareja JC, Aonuma H, Miura M, Xu T
  • 雑誌名: Developmental cell 16 ページ: 458-65
  • 査読あり
• [雑誌論文] Caspase-9 activation revealed by semaphorin 7A cleavage is independent of apoptosis in the aged olfactory bulb (2009)
  • 著者名/発表者名: Ohsawa S, Hamada S, Asou H, Kuida K, Uchiyama Y, Yoshida H, Miura M
  • 雑誌名: The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience 29 ページ: 11385-92
  • 査読あり
• [雑誌論文] p38 MAPK-dependent phagocytic encapsulation confers infection tolerance in Drosophila (2009)
  • 著者名/発表者名: Shinzawa N, Nelson B, Aonuma H, Okado K, Fukumoto S, Miura M, Kanuka H
  • 雑誌名: Cell host & microbe 6 ページ: 244-52
  • 査読あり
• [雑誌論文] Temporal regulation of Drosophila IAP1 determines caspase functions in sensory organ development (2009)
  • 著者名/発表者名: Koto A, Kuranaga E, Miura M
  • 雑誌名: The Journal of cell biology 187 ページ: 219-31
  • 査読あり
• [学会発表] Live-imaging analysis of apoptosis in vivo by using transgenic mice expressing a genetically encoded reporter for caspase activation (2009)
  • 著者名/発表者名: Shinotsuka, N., Yamaguchi, Y., Takemoto, K., Miura, M
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-09
• [学会発表] Birth and death of the sensory organ precursor cells : a role of programmed cell death in Drosophila sensory organ development (2009)
  • 著者名/発表者名: 三浦正幸
  • 学会等名: The 4th International Workshop on Cell Regulations in Division and Arrest
  • 発表場所: Okinawa, Japan
  • 年月日: 2009-11-29
• [学会発表] Live-imaging analysis of apoptosis and caspase activation in mornhoefenesis (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi, Y., Shinotsuka N.Nonomura, K., Miura, M
  • 学会等名: he 4th International Workshop on Cell Regulations in Division and Arrest
  • 発表場所: Okinawa, Japan
  • 年月日: 2009-11-29
• [学会発表] Temporal regulation of Drosophila IAP1 determines the dual functions of caspases in the sensory organ development (2009)
  • 著者名/発表者名: 古藤日子, 倉永英里奈, 三浦正幸
  • 学会等名: 21^<st> European Drosophila Research Conference
  • 発表場所: Nice, France
  • 年月日: 2009-11-18
• [学会発表] IAPタンパク質の時空間的な発現変化はカスパーゼの非細胞死機能を制御する (2009)
  • 著者名/発表者名: 古藤日子、倉永英里奈、三浦正幸
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会シンポジウム
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-10-21
• [学会発表] Caspase-mediated apoptosis is dispensable for the control of cell number in the early developing brain (2009)
  • 著者名/発表者名: Nonomura, K., Yamaguchi, Y.Yoshida, H., Miura, M
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratory Meeting, Cell Death
  • 発表場所: New York, USA
  • 年月日: 2009-10-06
• [学会発表] 生体におけるカスパーゼ活性化ダイナミクス (2009)
  • 著者名/発表者名: 三浦正幸
  • 学会等名: 日本アポトーシス研究会学術集会ワークショップ
  • 発表場所: 長崎
  • 年月日: 2009-08-01
• [学会発表] A Role of Programmed Cell Death in Drosophila Bristle Pattern Formation : Appearance and Elimination of the Ectopic Sensory Organ Precursor Cells (2009)
  • 著者名/発表者名: 古藤日子, 倉永英里奈, 三浦正幸
  • 学会等名: The 9th Japanese Drosophila Research Conference
  • 発表場所: 掛川
  • 年月日: 2009-07-06
• [学会発表] 26S proteasome determines the onset and severity of age-related neurodegenerative disease (2009)
  • 著者名/発表者名: 三浦正幸
  • 学会等名: International Symposium on Autophagy and Cell Death
  • 発表場所: Tokyo, Japan
  • 年月日: 2009-07-04
• [学会発表] Programmed Cell Death Functions in Drosophila Bristle Pattern Formation (2009)
  • 著者名/発表者名: 古藤日子, 倉永英里奈, 三浦正幸
  • 学会等名: 第42回日本発生生物学会大会
  • 発表場所: 新潟
  • 年月日: 2009-05-28
• [学会発表] Is apoptosis required for the regulation of cell number in the early developing brain? -Quantitative analysis of morphological abnormalities in the brain of mice deficient for apoptosis signaling (2009)
  • 著者名/発表者名: Nonomura, K., Yamaguchi, Y.Yoshida, H., Miura, M
  • 学会等名: 第42回日本発生生物学会大会
  • 発表場所: 新潟
  • 年月日: 2009-05-28
• [学会発表] An effective and convenient method to express transgene by the combination of in utero electroporation and the Tol2 transposon system ; inducible or cell-type specific expression in glia (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshida, A., Yamaguchi, Y., Nonomura, K., Kawakami, K., Takahashi, Y., Miura, M
  • 学会等名: 日本発生生物学会 第42回大会
  • 発表場所: 新潟
  • 年月日: 2009-05-28
• [学会発表] ショウジョウバエを用いたポリグルタミン病へのアプローチ (2009)
  • 著者名/発表者名: 倉永英里奈、殿城亜矢子、三浦正幸
  • 学会等名: 第50回日本神経学会シンポジウム
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2009-05-22
• [備考]
  • URL: http://www.f.u-tokyo.ac.jp/~genetics/index.html