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2006 年度 実績報告書

環境適応に関わるゴルジ複合体の構造・機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 17051011
研究機関新潟大学

研究代表者

三ツ井 敏明  新潟大学, 自然科学系, 教授 (70183960)

キーワードイネ / オルガネラ / ゴルジ体 / 細胞分画 / α-アミラーゼ / N-acetylglucosaminyltransferase-I / 形質転換体 / プロテオーム
研究概要

本課題研究においては、環境に応答して変化するゴルジ体の形態と構成膜タンパク質を網羅的に解析し、環境適応に関わる植物ゴルジ体特有な構造・機能を解明することを目的として、(1)イネゴルジ複合体構成タンパク質の網羅的解析、(2)デンプン代謝関連酵素であり且つ糖タンパク質であるα-アミラーゼを強発現する形質転換イネにおけるゴルジ体の構造変化について解析を行った。
(1)ショ糖密度勾配遠心・沈降法およびフローティング法を駆使して、イネゴルジ体膜を単離し、イネゴルジ体膜に存在するタンパク質の同定を試みたところ、糖鎖合成・構築関連酵素タンパク、イオンやpHホメオスタシスにかかわるタンパク、小胞輸送にかかわるタンパク、ゴルジマトリックスタンパク、機能未知なendomembrane protein EMP70などが検出された。(2)α-アミラーゼ(AmyI-1)あるいはシスゴルジマーカー(GFP-SYP31)を強発現する形質転換イネ細胞を作成した。それぞれの形質転換細胞からN-acetylglucosaminyltransferase-I(GNT-I)を指標にゴルジ体膜を分画した。抗イネGNT-I抗体を用いたイムノブロット解析の結果、AmyI-1強発現細胞から調製したGNT-I結合ゴルジ体膜の膜密度が野生型細胞のそれと比較して高くなることが見いだされた。一方、GFP-SYP31発現細胞ではこのような現象は見られなかった。さらに、AmyI-1強発現細胞の電子顕微鏡観察からこの細胞においてはゴルジ装置の数の変化も見られることが分かった。これらの結果は、AmyI-1強発現イネ細胞においてはゴルジ体が野生型細胞とは異なる機能タンパク質や脂質で構成されている可能性を強く示唆した。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2006

すべて 雑誌論文 (6件)

  • [雑誌論文] Preparation and characterization of a novel rice plant-specific kinesin.2006

    • 著者名/発表者名
      Nobuhisa UMEKI
    • 雑誌名

      J. Biochem. 139

      ページ: 645-654

  • [雑誌論文] Intermolecular cross-linking of a novel rice kinesin K16 motor domain with a photoreactive ATP derivative.2006

    • 著者名/発表者名
      Nobuhisa UMEKI
    • 雑誌名

      J. Biochem. 139

      ページ: 831-836

  • [雑誌論文] Conformational change of the loop L5 in rice kinesin motor domain induced by nucleotide binding.2006

    • 著者名/発表者名
      Nobuhisa UMEKI
    • 雑誌名

      J. Biochem. 139

      ページ: 857-864

  • [雑誌論文] Rice plastidial N-glycosylated nucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase is transported from the ER-Golgi to the chloroplast through the secretory pathway.2006

    • 著者名/発表者名
      Yohei NANJO
    • 雑誌名

      Plant Cell 18

      ページ: 2582-2592

  • [雑誌論文] α-Amylase affects starch accumulation in rice grain.2006

    • 著者名/発表者名
      Satoru ASATSUMA
    • 雑誌名

      J. Appl. Glycosci. 53

      ページ: 187-192

  • [雑誌論文] Isolation and proteomic analysis of rice Golgi membranes : cis-Golgi membranes labeled with GFP-SYP31.2006

    • 著者名/発表者名
      Tsuyoshi ASAKURA
    • 雑誌名

      Plant Biotech. 23

      ページ: 475-485

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公開日: 2008-05-08   更新日: 2016-04-21  

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