| 研究概要 |
本研究では薬物や胆汁成分の胆汁排泄に関わるトランスポーター分子群(MDR3, BSEP, FIC1などでいずれも進行性家族性肝内胆汁うっ滞症PFICの原因遺伝子)に焦点をあて、その相互作用分子の同定・機能解析を中心に検討を進めてきた。本年度は、昨年度までに得られた研究成果を基礎研究としてさらに発展させるとともに、生理的意義や病態との関連など、臨床的な視点からの検討も加えた。MDR3結合蛋白として見出されたRACK1に関しては、MDR3の局在のみならずその蛋白質翻訳過程も正に制御することが明らかとなり、IUCK1がMDR3を多段階に渡って制御する可能性が示された。RACK1がin vivoにおいてもMDR3の発現調節に関わるか否かを検証するために、in vivoにおいてRACK1の発現を抑制するshRACK1を組み込んだアデノウィルスを作製した。現段階でマウスにおいて一過性に肝臓のRACK1発現を選択的に低下することに成功し、今後この系を用いて個体レベルでの解析を行う予定である。BSEPの相互作用因子として見出されたUsp14はBSEPにおいて見られるモノ〜短鎖ユビキチンを脱ユビキチンする可能性が示唆され、Uspl4発現抑制によりBSEPの蛋白質発現量に影響せず、その膜表面発現量が低下することが示された。これら新規相互作用因子による輸送体発現調節と病態発症との関連を今後検証する必要がある。一方、FIC1に関してはCDC50Aと相互作用を介して細胞膜へ移行することが報告されていたが、少なくとも一部のPFIC1患者で見出されている3種類の変異に関してはCDC50Aとの相互作用ができずに細胞膜移行できないことが病態発症の一因となることを明らかとした。
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