| 研究分担者 |
丸山 征郎 鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (20082282)
松山 隆美 鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (30145479)
馬場 昌範 鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (70181039)
吉田 光敏 鹿児島大学, 農学部, 教授 (00174954)
藤吉 利信 鹿児島大学, フロンティアサイエンス研究推進センター, 准教授 (50173480)
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| 研究概要 |
1)前年度に得たミニブタ雌からのクローンミニブタ産仔(雌)は正常な発育・成長、次いで正常妊娠とその経過後に4頭の産仔を出産し、クラウン系クローンミニブタの正常発育・出産を証明した。
2)ミニブタ初代培養細胞を用いてα-1,3-ガラクトース転移酵素(α GalT)を不活性化した細胞作成のため、核移植用α GalT gene targetingドナー細胞作成を試みているが、今年度中のクローン株化を得ていない。
3)ミニブタ飼育員へのPERVの感染の有無を調べるために、ジャパンファームクラウン研究所(JFCI)従業員の末梢血からRNAおよびDNAを抽出し、PERV-gag、 pol、 env-A,B,C特異的PCRプライマーを用いてgenomic DNA PCRおよびRT-PCR法でPERVのゲノムDNAおよびRNAを調べたところ、Genomic-PCRおよびRT-PCRではPERV-gag、 pol、 envは検出されず、PERVの感染は認めなかった。この結果は、クラウン系ミニブタのPERVは、通常の飼育環境ではヒトへの感染性が低いことを示唆している。
4)前年度までの研究から、異種移植の慢性拒絶反応に関与していると推定されるHMGB-1の放出は細胞の接着に依存し、HMGB-1のup-regulationとreleaseのtriggerはヒトT細胞の細胞膜上にあることを見出した。
5)異種移植拒絶反応のin vitroモデルとしてブタ内皮細胞を傷害するヒト免疫系細胞の測定系の確立は重要な課題である。今年度は、ブタ内皮細胞を傷害するヒト細胞傷害性CD8細胞の機能を制御するヒト制御性樹状細胞、制御性T細胞の実験系を作成した。
6)PERVを産生するブタ腎細胞に種々の薬剤を作用させ,PREVの産生抑制効果を調べたところ,フルオロキノリン誘導体のK-37に,PERV産生を抑制する効果があることを見出した。
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