• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2008 年度 実績報告書

分子進化ファージライブラリー法を用いた感染阻害剤の開発

研究課題

研究課題/領域番号 17300159
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

佐藤 智典  慶應義塾大学, 理工学部, 教授 (00162454)

研究分担者 松原 輝彦  慶應義塾大学, 理工学部, 講師 (10325251)
キーワード糖脂質 / ガングリオシド / ヘマグルチニン / ファージライブラリー / インフルエンザ / 分子進化 / ペプチド / 感染阻害剤
研究概要

分子進化の方法として、ペプチド配列の改変とペプチドの修飾方法の2つの手法を行なった。
以前にファージ提示法を用いて同定されたインフルエンザウイルスヘマグルチニンに結合する感染阻害ペプチド配列を出発配列としてランダム変異をさせたサブライブラリーの構築を行なった。これまで行なって来たライブラリーの作製では高い多様性のあるライブラリーを作製することが難しかったため、この問題を改善するためにファージベクターの制限酵素切断部位の検討を行った。その結果、これまで用いて来た切断部位をBamHIに変換することにより、これまでのベクターよりも効率よく形質転換できるベクターを作製できた。このベクターを用いてランダムに変異させたライブラリー(15アミノ酸配列のうち平均3.3残基に変異)および結合に関与するモチーフ残基(4残基)を固定したライブラリーの2つを作製した。作製したサブライブラリーを用いてインフルエンザヘマグルチニンに対して親和性選択を行なったところ、これまでの配列と同程度の結合活性を有するペプチドを数種類同定することに成功した。ペプチドはしばしば合成が困難であったり、溶解性が低いことがあり、高い活性を有する類似した配列が必要となるため、今回得られた配列は新たな阻害剤候補である。また、βアミロイドが結合するガングリオシドGM1への結合性を有するペプチドの分子進化工学的手法によるファージライブラリーの作製を行った。上記と同様に制限酵素部位を変換したことにより、効率よくモチーフ部分とそれ以外の部分に勾配をつけた変異を導入した分子進化ファージライブラリーを作製した。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2009 2008

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (5件)

  • [雑誌論文] Selection of carbohydrate-binding domain with a helix-loop-helix structure2008

    • 著者名/発表者名
      T. Matsubara, M. Iida, T. Tsumuraya, I. Fujii, T. Sato
    • 雑誌名

      Biochemistry 47(26)

      ページ: 6745-6751

    • 査読あり
  • [学会発表] ライブラリー選択法で得られた新規ペプチドによる細胞表面糖鎖の機能制御2009

    • 著者名/発表者名
      松原輝彦
    • 学会等名
      日本化学会第89春季年会
    • 発表場所
      日本大学理工学部船橋キャンパス
    • 年月日
      2009-03-28
  • [学会発表] インフルエンザウイルス感染阻害ペプチドの活性を向上する化学修飾2009

    • 著者名/発表者名
      千葉頌子, 松原輝彦, 佐藤智典
    • 学会等名
      日本化学会第89春季年会
    • 発表場所
      日本大学理工学部船橋キャンパス
    • 年月日
      2009-03-27
  • [学会発表] 細胞表面のシアル酸含有糖鎖を標的とするペプチドの設計および機能解析2008

    • 著者名/発表者名
      松原輝彦・山下美季・野殿英恵・佐藤智典
    • 学会等名
      第57回高分子討論会
    • 発表場所
      大阪市立大学
    • 年月日
      2008-09-24
  • [学会発表] ヘマグルチニン結合性ペプチドの改変および短鎖化によるインフルエンザウイルス感染阻害活性の向上2008

    • 著者名/発表者名
      松原輝彦, 斎藤智美, 山口大介, 大西愛, 佐藤智典
    • 学会等名
      第18回バイオ・高分子シンポジウム
    • 発表場所
      上智大学
    • 年月日
      2008-07-26
  • [学会発表] シアリルオリゴ糖結合性ペプチドのインフルエンザウイルス感染阻害活性2008

    • 著者名/発表者名
      松原輝彦, 角真智子, 久保田博之, 佐藤智典
    • 学会等名
      第57回高分子学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2008-05-28

URL: 

公開日: 2010-06-11   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi