RNAポリメラーゼ改変による微生物潜在機能の発現と転写機構の統括的解明

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17380058
• 研究機関: 独立行政法人農業技術研究機構
• 研究代表者: 越智 幸三 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構, 食品総合研究所食品バイオテクノロジー研究領域, ユニット長 (70353985)
• キーワード: RNAポリメラーゼ / 転写制御 / 二次代謝 / 抗生物質 / 緊縮制御 / 放線菌 / 枯草菌 / Thermus

研究概要

1.放線菌各種を用いて、低レベル(rsmG)および高レベル(rpsL)ストレプトマイシン耐性変異を付与することにより、抗生物質生産性が相乗的に増大することを示した。
2.放線菌S.coelicolorにおいて、K88E rpsL変異と共存することにより抗生物質アクチノロージンの生産力を飛躍的に上昇させる変異(GI92 rpsL)を見い出した。その機作は、生育後期における蛋白質合成の活性化にあることも明らかにした。
3.枯草菌のカスガマイシン耐性変異の多くはksgA遺伝子に生じている事を明らかにし、しかもひとたびksgA変異を獲得すると、更なる高レベルの耐性変異を異常に高い頻度(10^<-6>)で獲得することを明らかにした。この変異はspeD遺伝子に生じたものであることも、マイクロアレー変異探索法を用いて明らかにした。
4.枯草菌の低レベルフシジン酸耐性のひとつにmdtRP変異があることを明らかにした。かつ、耐性獲得に到るそのメカニズムも明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Novel gene regulation mediated by overproduction of secondary metabolite neotrehalosadiamine in Bacillus subtilis (2009)
  • 著者名/発表者名: T Inaoka, T Satomura, Y Fujita, K Ochi
  • 雑誌名: FEMS Microbiol Lett 291 ページ: 151-156
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inactivation of KsgA, a 16S rRNA Methyltransferase, Causes Vigorous Emergence of Mutants with High-Level Kasugamycin Resistance (2009)
  • 著者名/発表者名: K Ochi, J Kim, Y Tanaka, G Wang, K Masuda, H Nanamiya, S Okamoto, S Tokuyama, Y Adachi, F Kawamura
  • 雑誌名: Antimicrobial Agents and Chemotherapy 53 ページ: 193-201
  • 査読あり
• [雑誌論文] Biosynthesis of Actinorhodin and Related Antibiotics : Discovery of Alternative Routes for quinine Formation Encoded in the act Gene Cluster (2009)
  • 著者名/発表者名: S Okamoto, T Taguchi, K Ochi, K Ichinose
  • 雑誌名: Chemistry & Biology 16 ページ: 226-237
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dramatic Activation of Antibiotic Production in Streptomyces coelicolor by Cumulative Drug Resistance Mutations (2008)
  • 著者名/発表者名: G Wang, T Hosaka, K Ochi
  • 雑誌名: Applied and Environmental Microbiology 74 ページ: 2834-2840
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activation of Dormant Bacterial Genes by Nonomuraea sp. Strain ATCC 39727 Mutant-Type RNA Polymerase (2008)
  • 著者名/発表者名: A Tala, G Wang, M Zemanova, S Okamoto, K Ochi, P Alifano
  • 雑誌名: Journal of Bacteriology 191 ページ: 805-814
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Novel Insertion Mutation in Streptomyces coelicolor Ribosomal S12 protein results in paromomycin Resistance and Antibiotic Overproduction (2008)
  • 著者名/発表者名: G Wang, T Inaoka, S Okamoto, K Ochi
  • 雑誌名: Antimicrobial Agents and Chemotherapy 53 ページ: 1019-1026
  • 査読あり
• [学会発表] ストレプトマイシン弱耐性変異rsmG導入による Streptomyces 属の二次代謝能の変化 (2008)
  • 著者名/発表者名: 田中幸徳, 他
  • 学会等名: 2008年度日本放線菌学会
  • 発表場所: 山梨県山梨市
  • 年月日: 2008-10-10